激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定.doc

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1、激素对血糖浓度影响及血糖浓度的测定石烽11.武汉科技大学医学院临床1105班湖北 武汉 430065[摘要]目的:掌握血糖的测定原理和方法;掌握血糖的正常范围及意义;熟悉调节血糖的激素对血糖浓度的影响。方法:家兔动物实验。获取家兔注射激素前后的血液样本并对其;进行血糖测定。邻苯甲胺方法测定血糖浓度。结果:注射肾上腺素后的家兔血糖水平较注射前有明显上升。最终得出注射肾上腺素前血糖浓度=88.9mg%,注射后血糖浓度=156.7mg%。同样,注射胰岛素后的家兔血糖水平较注射前则有明显下降。注射胰岛素前家兔空腹血糖含量为89.3mg%,注射胰岛素后为72.0mg%。结论:调节血糖类

2、激素对血糖水平有显著地影响。[关键词]胰岛素;肾上腺素;血糖.实验采取前后对照的方法,对家兔注射肾上腺素,并通过耳缘静脉采血,获取激素注射前后的血液样本,采用邻甲苯胺法处理样本,最终与标品比色得出结论。原理:1.调节血糖的激素有:胰岛素、肾上腺素、胰高血糖素、肾上腺皮质激素、生长素和甲状腺素等。胰岛素是体内唯一能使血糖降低的激素,其他激素均使血糖升高。2.肾上腺素升高血糖的机制主要作用于肝细胞膜受体,通过cAMP-蛋白激酶系统激活肝磷酸化酶,同时抑制糖原合成酶,导致肝糖原分解加速。胰岛素降低血糖的机制是:降低肝细胞cAMP水平,从而抑制肝磷酸化酶,激活糖原合成酶,促进肝糖原的

3、合成;胰岛素诱导糖酵解关键酶类的合成,阻遏糖异生关键酶的合成;胰岛素促进葡萄糖进入红细胞、肌肉等组织的异化扩散,促进糖的利用。3.血液中的葡萄糖,在热的冰醋酸溶液中可脱水生成5-羟甲基-2-呋喃甲醛(或称羟甲基糠醛)。后者在与邻甲苯胺缩合,生成蓝绿色的西夫式碱(Schiffbase)。其色泽的深浅与葡萄糖浓度成正比。与同样处理的标准葡萄糖溶液比色,即可求得待测血液中葡萄糖的含量。1材料与方法1.1材料:空腹状态下的2.3Kg家兔一只,空腹状态下的2.6Kg家兔一只,刀片,草酸钠,小烧杯.试剂:①肾上腺素(1mg/lml)②胰岛素(5单位/ml)③碘酒、消毒酒精④饱和硼酸溶液⑤

4、邻甲苯胺-硼酸⑥5%三氯醋酸溶液⑦饱和苯甲酸溶液⑧标准葡萄糖贮存液(1ml=10mg葡萄糖)⑨标准葡萄糖应用液(1ml=0.1mg葡萄糖)1.2方法(注射肾上腺素):取健康正常家兔一只,实验前饥饿14~16h左右,称体重。1.耳缘静脉采血。小刀刮去耳缘的毛,用酒精棉球擦拭使其充血,再用干棉球擦干。刀片划开耳缘静脉,使血液滴入成有足够草酸钠的小烧杯中,注意收集期间要不断地晃动烧杯防止血液凝固。采集完毕后干棉球压迫血管止血。2.给家兔注射肾上腺素(0.5mg/只),半小时后同样方法采得血液。3.抗凝血0.4ml,缓缓放入洁净试管内,加5%三氯醋酸3.6ml,同时摇动使之充分混匀。

5、3000rpm离心5min,制得无蛋白血滤液(上清液)。4.取四支试管,分别加入2.5ml邻甲苯胺试剂。并向试管1加入1ml蒸馏水,试管2加入1ml标准葡萄糖应用液,试管3加入1ml注射激素前的血液的无蛋白滤液,试管4加入1ml注射激素后的血液的无蛋白滤液。5.混匀后沸水加热8min,取出并用自来水冲洗试管使之冷却。而后置于722型分光光度计630nm比色,空白管校正零点。1.3表加试剂如下表:ml空白管标准管待测管甲(药前)待测管乙(药后)蒸馏水1.0―--标准葡萄糖应用液-1.0--无蛋白血滤液(药前)--1.0-无蛋白血滤液(药后)---1.0邻甲苯胺试剂2.52.52

6、.52.5同理,对家兔进行肾上腺素注射(剂量为5单位/公斤体重)并进行上述步骤,最终得出结果2结果2.1测量值标准管光密度=0.4102胰前光密度=0.3665胰后光密度=0.2951标准管光密度=0.5614肾前光密度=0.4991肾后光密度=0.87952.2计算:血糖(mg%)=0.D测定/0.D标准*0.1*1/0.1*100=0.D测定/0.D标准*100。即血糖(mg%)=测定/标准x1002.2.数据代入注射胰岛素前的血糖=0.3665/0.4102*100=89.3mg%注射胰岛素后的血糖=0.2951/0.4102*100=72.0mg%注射肾上腺素前的血糖

7、=0.4991/0.5614*100=88.9mg%注射肾上腺素后的血糖=0.8795/0.5614*100=156.7mg%即:注射胰岛素可降低血糖,而注射肾上腺素则有相反的作用。3讨论激素对血糖浓度的影响是显著的。由实验可知,即使是很少剂量的激素即可使血糖浓度在短时间内有显著地变化。在注射肾上腺素后的半个小时内,血糖的浓度即升高了67.8%,家兔的表观反应也很明显,注射激素后,其活动量明显增多,较注射前亦有很大不同。需要注意的是为什么在饥饿15h之后家兔的血糖浓度依然在正常值范围内?这说明一段较长时

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