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时间:2018-11-30
《实验-血糖测定(葡萄糖氧化酶法)》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在应用文档-天天文库。
1、实验血糖测定(葡萄糖氧化酶法)【目的】体外测定血清或血浆中葡萄糖含量。【临床意义】葡萄糖的准确测定对于诊断高血糖症是十分重要的。通常在查找这些病症的起因时,还将各种耐量试验和抑制试验与葡萄糖测定一同进行。葡萄糖含量增高见于:糖尿病、葡萄糖摄入过量、柯兴氏综合症、脑血管意外。葡萄糖含量减少见于:胰岛瘤、胰岛素过量、先天性碳水化合物代谢障碍。【原理】样本中的葡萄糖经葡萄糖氧化酶作用生成葡萄糖酸和过氧化氢,后者在过氧化物酶的作用下,将还原性4-氨基安替比林与酚偶联缩合成可被分光光度计测定的醌类化合物。【器材】紫外分光光度计,恒温水浴箱,移液器(枪),枪头,试管【药品】葡萄糖测定试剂盒,试剂盒
2、主要成分与浓度:试剂主要成分实验浓度R1葡萄糖氧化酶(GOD)过氧化物酶(POD)≥13000U/L≥900U/LR2磷酸缓冲液(pH7.0)酚4-氨基安替吡啉100mmol/L11mmol/L0.77mmol/L葡萄糖标准液5.55mmol/L(100mg/dl)【样本】新鲜无溶血血清。【步骤】将10mlR1与90mlR2混合均匀,即为工作液。空白管校准管样品管工作液1.50ml1.50ml1.50ml蒸馏水0.01ml————校准液——0.01ml——样品————0.01ml分别混合均匀,37℃水浴10~15分钟(避免太阳光直射),用波长505nm、比色杯光径1.0cm,用空白管调
3、“零”点测定各管的吸光度(A)值。【计算】【参考值】血清/血浆:3.89—6.11mmol/L(70—110mg/dl)。此范围仅供参考,各实验室须建立本室的参考值范围。【参考文献】1.全国临床检验操作规程(第二版),主编:叶应妩,王敏三,1997,P616.2.TrinderP.AnnClinBiochem,1969,6:24-27.血糖测定实验所需器材:1.紫外分光光度计(比色杯光径1.0cm),2.恒温水浴箱(能调温度的,37℃),3.移液器(枪)(规格1.0ml6个,20µl6个),枪头各100个4.试管50支,6个试管架5.烧杯100ml一个,50ml(或25ml)6个6.记
4、号笔6支1.蒸馏水1瓶
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