吲哚美辛纳米胶体金分子印迹聚合物的制备及其在固相萃取中的应用.pdf

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1、第22卷第3期化学研究与应用Vo1．22，No．32010年3月ChemicalResearchandApplicationMar．，2010文章编号：1004—1656(2010)03-0293-04吲哚美辛纳米胶体金分子印迹聚合物的制备及其在固相萃取中的应用魏双，李大伟’，杨红，王蓉妹，王俊聊，邓安平h(1．四川大学化学学院，四川成都610064；2．四川大学华西药学院，四川成都610041)摘要：以吲哚美辛(IDM)为模板分子，丙烯酰胺(AA)为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂，本体聚合法制备过程中加

2、入纳米胶体金，合成了吲哚美辛胶体金分子印迹聚合物(MIPs／Au)，利用MIPs／Au表面胶体金对蛋白吸附作用，将抗吲哚美辛的多克隆抗体固定在MIPs／Au上，得到表面固定有抗体的新型聚合物(MIPs／Au—Ab)并对其进行了表征。制备了填充材料为MIPs／Au—Ab的固相萃取柱并对其上样、淋洗和洗脱条件进行了优化，并将所制备的新型萃取柱用于水样中IDM的分离富集。抗吲哚美辛抗体交联在聚合物表面，不仅增加了萃取柱的特异性吸附容量，而且有效地降低了MIP的非特异性吸附。关键词：分子印迹聚合物；吲哚美辛；胶体金；固相萃取中图分类号

3、：0658．1文献标识码：A吲哚美辛(IDM)，又名消炎痛，是一种常用的在特异性吸附容量较低，与水相体系兼容性较差，非甾体抗炎镇痛药，但对消化系统，中枢神经系非特异性吸附较大等不足¨。本文拟合成掺有统，泌尿系统，造血系统存在较大毒副作用。近年纳米胶体金的分子印迹聚合物(MIPs／Au)，利用来已有报道¨指出至少有60种药物以低浓度的MIPs／Au表面胶体金对蛋白的吸附作用，将抗吲形式存在于水环境中如地表水，地下水，甚至饮用哚美辛的多克隆抗体固定在MIPs／Au上，得到表水，其中止痛药占有很大比重。尽管短期时间面固定有抗体的新型

4、聚合物(MIPs／Au—Ab)并对内，这类化合物的少量存在不会立即对生态及人其进行了表征。对制备填充材料为MIPs／Au．Ab类造成明显的影响，但水环境中长期累积将会干的固相萃取柱的上样、淋洗和洗脱条件进行优化，扰水生动物的内分泌系统。并且这些药物在水环并用于水样中IDM的分离富集。境中较稳定，不易降解，可通过食物链传递可能在人体内蓄积，因此，水体中残留的微量药物被认为1实验部分是一类新的环境污染物，它们对水生物的生长和人类健康都构成不利影响，引起人们日益关注，目I．1试剂与仪器前已有不少测定水体中残留药物的报道l4。吲哚美辛

5、标准品(99．9％，上海十七药厂)；阿文献报道吲哚美辛的测定，多为血液中药物西美辛(Sigma)；奥沙普秦(99．0％，湖北百科亨迪动力学的研究。主要测定方法是高效液相色谱法药业有限公司)；布洛芬(99．7％，湖北百科亨迪药(HPLC)，胶束电动色谱法，气相色谱法，毛业有限公司)；乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA。细管电泳分析等。这些方法具有较高的准确Fluka)；丙烯酰胺(AA)、偶氮二异丁腈(AIBN)、度，但是对于环境中的微量物质的测定，它们灵敏甲醇、乙酸、乙腈、氯仿(成都科龙化工试剂厂)；所度低，且需要繁琐的样品预处理

6、步骤。用试剂为分析纯或色谱纯。分子印迹聚合物(MIP)具有制作简单、成本高效液相色谱仪(Alhech，USA)；紫外一可见分低廉、坚固耐用、适用范围广等优点，但MIPs也存光光度计(uV一2300，上海天美公司)；超声波清洗收稿日期：2009-04-27；修回日期：2009~5．23基金项目：国家自然科学基金资助项目(20675054)联系人简介：邓安平(1962)，男，教授，研究方向免疫分析。Email：denganping6119@yahoo．eom．cn294化学研究与应用第22卷器(KQ—IOOE，昆山市超声波仪器有限

7、公司)；离心速过滤，取1mL滤液稀释到3mL，在316nm处测定机(TGL。16C，上海安亭科学仪器厂)；台式水浴恒IDM的浓度。根据吸附实验前后溶液中IDM的浓温振荡器(SHZ一88型，江苏太仓市实验设备厂)；度变化计算聚合物的结合量。集热式恒温加热磁力搅拌器(DF．101S，巩义市英1．5MIPs／Au—Ab的选择性峪予华仪器厂)。为了研究MIPs／Au-Ab的吸附选择性，选择了1．2胶体金及其胶体金分子印迹聚合物的制备和IDM具有相似结构的几种化合物进行吸附实加lOOmL0．O1％的HAuC1溶液于到25OraL验。取2

8、0g／mL的吲哚美辛、阿西美辛、奥沙普的烧杯中，加热煮沸，在搅拌下加入2．5mLl％的秦、布洛芬标准溶液各3mL，分别加入到20mg柠檬酸三钠，当颜色从蓝色变成深红色2rain后，MIPs／Au．Ab以及抗体失活的NIPs／Au—Ab中，l5再加热5rain。冷却置室温，加入