吖啶类荧光探针用于微量蛋白质测定的研究.pdf

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1、分∞析～测或化学工程师Sum230No．1lChemicalEngineer2014年第11期文章编号：1002—1124(2014)11-0023—04吖啶类荧光探针用于微量蛋白质测定的研究张丽娟．吴文强(1．福建生物工程职业技术学院药学系，福建福州350002；2．福建广生堂药业股份有限公司。福建福州350003)摘要：目的：利用合成的3种新型的蛋白质分子荧光探针N一(2～二甲氨基)乙基一9一氯吖啶一4一甲酰胺(NCAF)、9-【(N一2一二甲氨乙基)吖啶一4一甲酰胺卜一丙氨酸(NAFA)和4,9一二[N一(2

2、一二甲氨基)乙基】一9一吖啶胺一4一甲酰胺(DNAF)结合荧光发射光谱，建立了3种新的微量蛋白质测定方法。方法：通过建立适宜的NCAF—SDS(十二烷基硫酸钠)、NAFA—SDS和DNAF—SDS荧光猝灭体系，牛血清白蛋白(BSA)的加入对体系的荧光具有恢复作用，并随着BSA加人浓度的增大，荧光恢复程度逐渐增强，并在一定的浓度范围内呈线性关系，由此建立了用新型吖啶类荧光探针测定BSA的荧光分析新方法。结果：从NCAF、NAFA到DNAF测定线性范围分别为5．0X104~6．8X10，9．0X10一8．2X10和5．

3、0X108．3×10mol·L-；测定灵敏度(3，K)分别为1．1×10。，3．8X10。和1．0X10~mol·L～。结论：该测定方法具有良好的荧光响应和稳定性，为微量蛋白质定量分析提供了新的技术体系。关键词：吖啶类荧光探针；蛋白质定量分析；荧光分析法中图分类号：0657文献标识码：AResearchintotheapplicationofacridinefluorescenceprobestotraceproteinmeasurementZHANGLi-juan，WUWen-qiang(1．Department

4、ofPharmacy，FujianVocationalandTechnicalInstituteofBiologicalEngineering，Fuzhou350002，China；2．FujianCosunterPharmaceuticalCo．，Ltd．，Fuzhou350003，China)Abstract：Objective：Toestablishthreenewwaystomeasuretraceproteinbyutilizing3newsynthetizedtypesofproteinmolecule

5、fluorescenceprobes，namely，NCAF，NAFAandDNAFandbycombiningwithfluorescencee—missionspectrum．Method：FirstestablishaproperfluorescencequenchingsystemofNCAF—sodiumdodecylsulfate(SDS)，NAFA-SDSandDNAF—SDS，thenaddbovineserumalbumin(BSA)tohelprestorethefluorescenceofth

6、esystem，andthehighertheconcentrationofBSAadded，themorethefluorescenceisrestoredwithlinearrelation—shipexhibitedwithincertainconcentrationrange，andthuswehaveestablishedanewfluorescenceanalysismethodofmeasuringBSAwithnewtypesofacridinefluorescenceprobes．Result：T

7、heeffectsofNCAF、NAFAandDNAFaregoodwiththemeasuredlinearrangeof5．0x10-9—6．8X10．9．0xl0-98．2x10and5．0x10-9·8．3×10mol‘L-respectivelyandthemeasurementsensitivity(3~r／K)of1．1xl0一．3．8x10一。and1．0xl0一’。mol。L—respec—tively．Conclusion：Thesaidmeasuringmethodboastsgoodfluo

8、rescenceresponseandstability，andthusoffersanewtechnicalsystemforthequantitativeanalysisoftraceprotein．Keywords：acridinefluorescenceprobes；quantitativeproteinanalysis；fluorescencean