小麦DNA损伤修复基因TaXRCC4、TaKu70和TaKu80的克隆及分析.pdf

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1、CloningandCharacterizationof死泷RC饼、劢勋70and死墙协8口inWheatDNADamageRepairPathwayThesissubmittedtoQingdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofScienceWangQing(CollegeofLifeScience)Supervisor：Prof．SongXi-yunProf．LiuLu—xiangQingdao．ChmaMay．2011青岛农业大学硕士学位论文摘要⋯

2、Abstract目录英文缩写词表第一章文献综述⋯⋯⋯⋯．1．1小麦诱变育种1．1．1伽马射线诱变育种1．1．2中子诱变育种．．1IlllllIlllllIllllllllIIIIlllllllllllllllI二Y23322361⋯⋯。31．1．3质子诱变育种⋯⋯⋯⋯．1．1．4诱变育种新技术1．2诱变育种的分子机制⋯5⋯⋯．．81．2．1DNA双链断裂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．2．2NHF_Jj盒径⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．91．2．3修复元件

3、1．3目的和意义⋯⋯102．1实验材料一2．1．1植物材料TaKu70和TaKu80基因的克隆与序列分析⋯⋯⋯⋯132．1．2实验试剂及耗材2．1．3引物序列2．1．4分析软件2．2实验方法2．2．1种子萌发及材料准备2．2．2小麦幼胚总RNA提取⋯⋯⋯2．2．3小麦幼苗DNA的提取。2．2．4RNA反转为单链cDNA13⋯⋯152．2．5PCR扩增目标基因DNA序列⋯⋯⋯2．2．6PCR产物的克隆和测序⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．2．3结果与分析151718⋯⋯．18⋯⋯．212．3．1TaXRCC4基因eDNA的克隆与序列分析⋯⋯2．3．2基因组序列的克隆⋯⋯⋯2．3．3

4、基因的染色体定位⋯⋯．26青岛农业大学硕士学位论文目录2．3．4基因的结构分析⋯⋯⋯⋯⋯2．4讨论2．4．1TaXRCC4基因的序列特征⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯312．4．2TaKu70基因的序列特征⋯⋯⋯⋯⋯。2．4．3TaKu80基因的序列特征⋯32第三章TaXRCC4、TaKu70和TaKu80基因的表达分析3．1实验材料⋯⋯．3．1．1植物材料3．1．2实验试剂及耗材3．1．3实验仪器3．1．4引物序列3233．33⋯⋯33⋯．333．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯．3．2．1材料的辐照处理33⋯⋯333．2．2辐照处理后种子的发芽实

5、验．343．2．3实时荧光定量PCR实验材料准备3．2．4小麦幼胚总RNA提取．3．2．5RNA反转为单链eDNA343．2．6Real-timePCIL⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．343．2．7数据分析．3．3结果与分析¨35．．353．3．1辐照处理对小麦的损伤效应3．3．2NE[EJ关键基因对不同类型电离辐射处理的响应模式3．3．3电离辐射后N-HEJ关键基因的表达随小麦萌发而诱导表达的趋势3．4讨论．383．4．1电离辐射对小麦产生的形态学效应3．4．2NHEJ关键基因对不同种类电离辐射处理的响应模

6、式不同．．3．4．3电离辐射后恻关键基因表达随萌发而变化的趋势不同第四章结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯51致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯52545558⋯⋯⋯62青岛农业大学硕士学位论文目录Abstract．．Englishabstract．AbbreviationkeyContentsChapter1SummaryofLiterature1．1Wheatmutationbreeding．⋯⋯⋯⋯⋯．11．1．17-raysirradiationmutationbreeding3⋯⋯⋯41．1．2Neutronirradiationmutationbre

7、eding1,1．3Protonirradiationmutationbreeding⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．1．1．4Newtechniquesinmutationbreeding⋯⋯．．，⋯⋯．．6⋯61．2Molecularmechanismofmutagenesis⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．81．2．1I)：NAdouble-strandbreaks⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯91．2．2NHEJrepairpathway．1．2_3Repairing