纯培养和dgge方法研究斜带石斑鱼仔稚鱼.doc

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1、纯培养和DGGE方法研究斜带石斑鱼仔稚鱼消化道菌群结构孙云章",凌泽春"，杨红玲（1集美大学水产学院省高校水产科学技术与食品安全重点实验室,福建厦门361021；2集美大学水产学院厦门市饲料检测与安金评价重点实验家，福建厦门361021：斜带石斑鱼是名贵优良的海水养殖品种，其生长快，适应能力强，加之肉质鲜美，营养丰富，市场价值高，在我国东南沿海及东南亚国家已有较大规模的养殖。但是，国内外有关其消化道菌群结构及其发展变化的研究很少。木实验拟利用常规微生物学方法和PCR/DGGE方法研究研究斜带石斑鱼孵化后2d（未开口）仔鱼、8d（开口仔鱼）、22d仔鱼、40d稚鱼消化道菌群结构的

2、发展变化，为深入研究石斑鱼消化道菌群与石斑鱼生长和健康的关系及水产动物微牛态制剂的研制提供理论依据。常规微生物学结果表明，仔稚鱼消化道可培养细菌总数随着生长日龄的增加而逐渐递增,由4.0X102CFU/尾增加到1.4X107CFU/尾;2d仔鱼分离到乳酸菌,未分离到弧菌；8d、22d仔鱼及40d幼鱼均未分离到乳酸菌，22d仔鱼、40d幼鱼分离到弧菌；开口前后可培养细菌种类变化较大，种类由多到少。2d、8d、22d仔鱼和40d幼鱼可培养细菌种类分别为6种、3种、5种、10种;2日龄、8日龄及22日龄仔鱼与进水口细菌种类有一定的相似，8日龄仔鱼及22日龄仔鱼与其饵料细菌种类有一定程

3、度的相似。DGGE结果显示,2d、8d和22d仔鱼消化道菌群DGGE图谱相似,仔鱼和40d稚鱼消化道菌群DGGE图谱存在明显差异，提示仔鱼到稚鱼发展过程屮，存在较大的菌群演替。仔鱼与养殖水体菌群DGGE图谱具有一定的相似性。22d仔鱼与后期饵料轮虫菌群图谱相似性较高，8d仔鱼与早期饵料牡蛎受精卵的相似性较低。总之，纯培养和DGGE结果均显示，仔鱼到稚鱼发育过程屮，消化道菌群不稳定，水体和饵料屮的大量细菌随着仔鱼开口进入消化道，但只有部分细菌可以在消化道定植。因此，仔稚鱼阶段可能是使用益生菌的最佳吋期。