施万细胞对共培养神经干细胞增殖及分化影响.doc

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1、施万细胞对共培养神经干细胞增殖及分化影响［摘要］目的：探讨施万细胞诱导神经干细胞增殖与分化的影响因素。方法：大鼠胚胎神经干细胞单独培养及与新生SD大鼠施万细胞共培养，观察神经干细胞的形态变化，并分别检测特异性标志蛋白S-100、NF和GFAP的表达。结果：相差显微镜下可见共培养组大部分神经干细胞伸出多个细长突起；与单独培养组相比，免疫荧光染色显示共培养组NF表达阳性细胞数多；GFAP表达阳性细胞数少。结论：施万细胞可促进共培养的神经干细胞增殖，并可诱导神经干细胞向神经元方向分化。［关键词］施万细

2、胞；神经干细胞；增殖；分化［中图分类号1R329.2［文献标识码］B［文章编号］1673-7210(2007)09(a)-098-02EffectsofSchwannCellsonthegenerationanddifferentiationofneuralstemcellsinvitroLIUZhong,ZENGShui-lin,LIFeng-fei,JIANGYu,ZHUJian-bao(InstituteofNeurobiology,SoutheastUniversity,Nanjing2

3、10009,China)[Abstract]Objective：ToexploretheinfluencingfactorsofSchwannCellsinpromotingneuralstemcellstogenerateanddifferentiateinvitro.Methods：Neuralstemcellsweredissociatedandclonedfromthecerebralsubventricularzoneofembryorats，SchwannCellswerealsod

4、issociatedandpurifiedsimultaneouslyfromthesciaticnervesofnewbornrats.ThenneuralstemcellswereculturedseparatelyandCo-culturedwithSchwannCells・TheexpressionofproteinSTOO,neurofilamentprotein(NF)andglialfibrillaryacidicprotein(GFAP)oftheneuralstemcellsw

5、eredetectedbyimmunofluorescence・Themorphologicalchangesofneuralstemcellswereexaminedwithcontrastphasemicroscope・ResuIts：Theco-culturedgroupshadmorepositiveCellsofproteinS-100andNF,andlesspositivecellsofGFAPthanthegroupculturedseparately.Thenervouspro

6、cessofneuron-likecellsinCo-culturedgroupswereobviouslylongerandmorethanthatinseparatelyculturedgroup・Conclusion:SchwannCellscanpromotethegenerationanddifferentiationofneuralstemcellsinvitro.[Keywords]SchwannCells；Neuralstemcells；Generation；Differenti

7、ation神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)是指存在于神经系统内的具有自我复制能力和多向分化潜能的细胞［1］。研究证明，NSCs不仅存在于哺乳动物胚胎脑组织，而且存在于发育和成熟的CNS,如大脑皮质、海马、脑室下区等可分离出NSCs,这不仅改变了成年动物的神经细胞不能分裂的传统观点，而且在研究脑的发育和分化以及相关疾病治疗上均具有重大价值［2,3］o施万细胞(SchwannCells,SCs)作为周围神经系统的主要胶质细胞，包绕周围神经轴突形成有髓或无髓神经纤维，能分泌多种细

8、胞因子与营养因子、细胞外基质及细胞黏附因子，有利于维持神经元的生存和NSCs的发育［4,5］。我们已经报道了将NSCs与嗅鞘细胞(OECs)共培养，观察到OECs能促进NSCs向神经元分化，部分可以分化为多巴胺能神经元［6］。研究证明血清也可诱导NSCs分化。因此，寻找控制NSCs分裂的途径以及NSCs定向分化的方法是目前NSCs研究的热点之一。1材料与方法1.1动物及主要试剂孕14.5d和新生SD大鼠由东南大学医学院动物中心提供。DMEM/F12.B27、胎牛血清均购自Gibco公司；S-10