人牙周膜成纤维细胞论文：塞来昔布对il-1β诱导下人牙周膜成纤维细胞中cox-2、il-8表达的影响

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1、人牙周膜成纤维细胞论文：塞来昔布对IL-1β诱导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2、IL-8表达的影响【中文摘要】（1）观察不同浓度IL-1β诱导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2的表达情况。（2）观察塞来昔布对IL-1β诱导的人牙周膜成纤维细胞表达COX-2和IL-8的影响，为探讨塞来昔布控制牙周组织炎症的临床应用提供实验依据。方法：（1）体外原代培养人牙周膜成纤维细胞，并对其来源进行鉴定。（2）选取5～8代人牙周膜成纤维细胞，随机分为正常对照组和实验组，正常对照组加入无血清培养液，实验组分别加入含0.1ng/ml、0.5ng/ml、1ng/ml、5ng/

2、ml、10ng/mlIL-1β的无血清培养液，采用免疫组织化学方法和ELISA法检测HPLFs中COX-2的表达状况，并探寻实验浓度范围内，引起最强炎症的IL-1β浓度。（3）选取5～8代人牙周膜成纤维细胞，随机分为对照组和实验组，实验组为在含10ng/mlIL-1β的无血清培养基中分别加入0μM、10μM、25μM、50μM、100μM以二甲基亚砜（dimethylsulfoxide，DMSO）助溶的塞来昔布；对照组为含有同样浓度DMSO的无血清培养基。采用ELISA法检测塞来昔布对IL-1β诱导下人牙周膜成纤维细胞中COX-2和IL-8表达情况的影响

3、。结果：(1)体外成功的培养人牙周膜成纤维细胞，倒置显微镜下：细胞为长梭形或者星形，呈典型的成纤维样细胞形态；免疫组织化学染色：人牙周膜成纤维细胞抗角蛋白染色阴性，抗波形丝蛋白染色阳性，表现出来源于中胚层的成纤维样细胞特性。(2)不同浓度的IL-1β干预人牙周膜成纤维细胞后COX-2表达的免疫组化结果显示：正常对照组中COX-2呈阴性表达，经IL-1β诱导后的人牙周膜成纤维细胞中COX-2在胞浆和核膜呈阳性表达；且COX-2表达强度随IL-1β诱导浓度的升高呈现增强的趋势（P<0.05）。ELISA检测结果同样证实了COX-2的表达随IL-1β诱导浓度的

4、升高而增强（P<0.05）。（3）塞来昔布对经IL-1β诱导下HPLFs中COX-2表达影响的实验显示：不同浓度的塞来昔布均可减少致炎后HPLFs中COX-2的表达，与未加药组比较，P<0.05；且随着塞来昔布浓度的增加，HPLFs中COX-2表达呈现逐渐递减的趋势，实验各组间比较，P<0.05。对IL-8表达影响的实验显示：加有不同浓度塞来昔布的各实验组中，IL-8表达均有不同程度的减少，除10μM组外，其他加药组与未加药组比较，P<0.05；当塞来昔布的浓度在25μM内时，IL-8的表达随着塞来昔布浓度的升高而减少，在25μM时其表达最弱，与对照组比

5、较，P>0.05；当塞来昔布的浓度大于25μM时，IL-8的表达随着塞来昔布浓度的增加有小幅度的增高，但组间比较，差异无统计学意义，P>0.05。结论：(1)组织块培养法培养牙周膜成纤维细胞步骤简单易掌握，可为探讨牙周组织相关疾病提供实验条件。（2）IL-1β诱导人牙周膜成纤维细胞后有COX-2表达，且COX-2的表达强度与IL-1β浓度呈正相关关系，说明COX-2与牙周病的发生发展存在一定关系。(3)塞来昔布可有效减少经IL-1β干预后的人牙周膜成纤维细胞中炎症因子COX-2和IL-8的表达。【英文摘要】:(1)Toobservetheexpressi

6、onofCyclooxygenase2(COX-2)inHumanperiodontalligamentfibroblasts(HPLFs)bytheinterferenceofIL-1βwithdifferentconcentrations.(2)ToobservedtheinhibitionofCOX-2andIL-8producingbyspecificconcentrationofIL-1β-inducedHPLFswithvariedconcentrationsofcelecoxib，whichofferexperimentalfoundati

7、onfortheclinicaluseofcelecoxibtotreatperiodontitis.Methods:(1)CulturetheprimaryHPLFsinvitroandidentifythem.(2)Experimentswerecarriedoutwithcellsfromthefifthtoeighthpassages.It’srandomlydividedintocontrolandexperimentalgroups,thecontrolgroupisHPLFsinserum-freemedium,theexperimenta

8、lgroupisthesamebutadds0.1ng/ml、0.5ng/ml、