猪苓菌培养特性研究进展.doc

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1、猪苓菌培养特性研究进展摘要阐述了猪苓菌的形态结构、适牛条件、营养特性、培养基配方、适牛树种及猪苓菌与伴牛菌、蜜环菌的相互关系和诱导猪苓菌丝扭结形成菌核的相关因子,以期为猪苓菌的深入研究和人工栽培提供参考。关键词猪苓菌;培养特性;伴牛菌;蜜环菌;菌核形成猪苓菌(Dendropo1yporusumbellatus(Pers.)Julich),别名猪苓花、猪灵芝,于实体丛牛,肉质鲜美,其地下的菌核即为猪苓,是传统的真菌药物之一,在我国已有2000多年的药用历史。现代医学证明,猪苓具有消炎、利尿、渗湿、通淋、退肿、降压、轻身

2、耐老、抗癌、抗辐射等功能,临床丄可治尿路结石、黄疸、急性肾炎、暑热水泻、全身水肿、心源性水肿、腹泻、尿急、尿频、尿道痛、肝硬化、腹水、乙型肝炎。猪苓多糖制剂对肺癌、肝癌、食道癌、宫颈癌及白血病均有较好的临床效果。随着我国医疗事业的发展,以猪苓为原料的成品药必将得到进一步开发,探索人工栽培的新途径必然会倍受关注。该文就猪苓菌的培养特性进行了阐述,以期为猪苓菌的深入研究及人工栽培提供有价值的参考。1菌丝的培养特性1.1菌落与菌丝形态结构猪苓菌的分离一般可采用子实体、菌核组织分离和抱子分离。PDA、CPDA或GYA(葡萄糖

3、■酵母粉■琼脂粉)可作为分离或母种培养基[l-3]o在PDA上,猪苓菌落呈圆形,菌丝白色,絮状,气牛菌丝发达。在平板或斜面培养基上均具有较强的爬壁能力。猪苓菌色素的形成受培养基屮添加的成分(如单双糖、糖醇及酪氨酸)、温度、pH值和光照等因素的影响。猪苓菌丝细胞狭长,多分枝,细胞壁较薄,直径在0.95〜4.50呵[2,4]之间,牛殖菌丝上锁状联合突起结构明显,顶端有膨大。平行菌丝间常有长短不一的H型横向菌丝融合桥,进而形成菌丝网络。众多菌丝纠结或合并可形成直径10.0pm以上的菌索或大小为14.0〜16.0屮讣12.0

4、〜15.0

5、im的拟菌核结构。培养过程屮气牛菌丝可断裂形成节砲子或顶端单牛或2〜3个并牛,椭球形,大小为3.0〜16.0

6、imx2.5〜6.5pn的厚垣抱子。显微观察,在猪苓菌丝间散布有形状规则、晶形完整的八面体或双锥形草酸钙结晶。用高碘酸-Schiff试剂染色老化菌丝,在老化菌丝胞壁上或老化菌丝断裂处富积有大量能被染成淡红色、圆粒状的次牛代谢多糖结晶⑸。1・2温度、光照和pH值对猪苓菌牛长的影响猪苓菌丝在5〜35°C[6-8]范围内均可牛长,当温度低于15〜18°CW,菌丝牛长速度减慢,长势-•般,菌丝褐变缓慢或暂

7、无褐变。当温度高于28〜30°C时,菌丝牛长速度也出现减慢,长势变差,并易出现老化变褐[9,10]。在5°C以下或35°C以上,菌丝牛长几乎停滞。猪苓菌丝牛长的适宜温度为24±4°C,最适温度为25°C[4,8]o在黑暗和光照条件下,猪苓菌丝均可牛长。但在全黑暗下菌丝牛长快、长势好;全光照或12h光喑交替,菌丝牛长较慢,且易出现褐变老化[6,8]。有试验表明,每天给猪苓菌丝2〜3h的4°C低温处理,有利于诱导其菌核的产牛。一定温差(10°C)的变温处理和暗培养,可诱导猪苓菌丝直接分化子实体原基[6,8]o一般而言,多

8、数真菌都适宜在偏酸性环境屮牛长[11]。猪苓菌丝可以在pH值为3.5〜9.0的环境下牛长[4,8],但以屮性偏酸(pH值4.0〜7.0)的条件比较适合,pH值低于4.0或高于8.0的菌丝牛长慢、长势差,易出现菌丝褐化[6-8,10]o1.3菌丝牛长的营养特性1.3.1对碳源的利用。猪苓菌对碳源有较为宽泛的适应性。葡萄糖、蔗糖、果糖、半乳糖、麦芽糖、麦芽糖醇、低聚异麦芽糖、甘露糖、甘露醇、低聚甘露糖、木糖、木糖醇、低聚木糖、淀粉、糊精、甘油、山梨醇、乙醇、竣甲基纤维素等都可以作为猪苓菌丝牛长的碳源。其小麦芽糖、甘油、山

9、梨醇、麦芽糖醇、低聚杲麦芽糖作碳源菌丝牛长速度快,气牛菌丝发达,菌丝丛疏;淀粉、乙醇、半乳糖、木糖、木糖醇、低聚木糖作碳源菌丝牛长速度虽然较慢,但气牛菌丝极发达,菌丝丛厚,尤其是木糖醇和木糖为碳源吋,气牛菌丝最发达,菌丝丛最厚。葡萄糖、蔗糖、甘露糖、糊精、甘露醇、低聚甘露糖等作碳源菌丝牛长速度较快,气牛菌丝发达,但老化快;果糖作碳源菌丝牛长速度较快,气牛菌丝易组织化呈肉皮状[10,11]潴苓菌对竣甲基纤维素的利用率较低[12]。1.3.2对氮源的利用。有机氮源(动物性、植物性和微牛物性)比无机氮源更适合猪苓菌菌丝牛长

10、。在有机氮源屮,猪苓菌丝牛长速率和长势依次为:酵母膏〉黄豆粉>玉米糠〉蛋口月东〉隸皮粉[13];在无机氮源屮,猪苓菌丝牛长速率和长势依次为:硝酸钠>硫酸钱〉尿素[10]o猪苓菌在含尿素的培养基上,虽然径向牛长缓慢,但尿索能在一定的使用浓度范围内随浓度的升高较早地促使菌丝扭结形成幼小的白色拟核,并渐变成类似于猪苓菌核表面有油漆光泽的灰黑色拟核。菌

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