[精品]实验二菊花组织培养.doc

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1、实验二菊花的组织培养一、实验目的1.熟悉植物组织培养的基木过程;2.掌握菊花外植体的消毒、接种、无菌操作等基木操作技术。二、实验原理植物细胞具有全能性,可以进行组织培养。三、实验仪器超净工作台、70%酒精、0.1%升汞、无菌水、剪刀、锻子、解剖刀、培养基、培养皿、无菌滤纸、三角瓶、打火机、酒精灯、75%酒精、封口膜。四、实验材料从市场上买来的新鲜菊花五、实验步骤1.超净丁作台消毒。把用到的实验器材都放到超净工作台里,用紫外光照射30mino2.超净工作台消毒结束后打开风机,关闭紫外灯,用75%酒精擦洗手和超净工作台,点燃酒精灯,开始操作。3.外植体的消毒。用剪刀取幼嫩的菊花茎部

2、,剪去枝和叶多余部分,用白来水冲洗30min,并用刷子刷洗。将清洗干净的菊花茎部放在烧杯中转入超净T作台里,先放入70%酒精屮浸泡5-30s,用无菌水冲洗3次,用无菌滤纸吸干水分,再放入0.1%升汞屮浸泡3-8min,然后放入无菌水屮浸泡2min,其间不断摇动,取出菊花茎部再用无菌水冲洗3次,用无菌滤纸吸干水分,用解剖刀把茎部切成0.5-lcm大小的茎段,最后把茎段放到有培养基的平板屮,用封口膜封好。4.实验分为五组,每组找一个人来操作,每人操作四个外植体,每个外植体放入一个培养皿里,其外植体消毒过程如下:70%酒精消毒时间(秒)无菌水冲洗次数无菌滤纸吸干0.1%升汞消毒时间(

3、分钟)无菌水浸泡时间(分钟)无菌水冲洗次数无菌滤纸吸干5332310352315382330323六、注意事项1.要有无菌意识2.操作要规范3.外植体消毒时间要把握好

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