《仪器分析实验》分子荧光分析法.ppt

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1、西北大学基础化学实验原子光谱（略）光谱UV-Vis（紫外-可见）分分子吸收析(对光的吸收)IR（红外）分子光谱光致发光分子发光荧光、磷光其它发光形式如：化学发光等西北大学基础化学实验激发态能量的跃迁与转VR2S21发生激发化的形式和速率：V=0态反应icA1,A2吸收:10-15s2VRT1S11isc2V=01VR振动松弛：10-12sV=0ic内转化：10-11sPA1A2Fisc系间窜越：10-6~10-2sF荧光：10-9~10-6s3S201V=0P磷光：10-6~100s分子内的激发和衰变过程西北大学基础

2、化学实验激发光谱发射光谱组成、结构与衍化信息800Ex.☆物质的化学结构600☆环境与介质条件400☆与其它溶质的相互作用200☆反应动力学Rela0tive250300350400450500550600FluWavelength(nm)orescen西北大学基础化学实验ceIntensity1）共轭结构萘紫外区蒽蓝区丁省绿区2）刚性的平面结构-OO-OOCOO--COO荧光黄会发荧光酚酞不发荧光3）取代基NH2西北大学基础化学实验480042003600F=K﹒I0﹒φf﹒C3000C24001800I0：光源强度；

3、1200600φf：荧光量子产率；Flu0o550560570580590600610620rC：荧光体浓度）esWavelength(nm)cenc（☆注意：在一定浓度范eI围内适用）nten?问题：sity1）影响相对荧光强度的因素有哪些？2）试比较荧光法与紫外-可见分光光度法的分析性能。西北大学基础化学实验？问题：荧光光度计与紫外-可见分光光度计在光路设置上有什么不同？为什么？西北大学基础化学实验★常规分析应用：☆定性分析：φf；λex；λem；峰形等☆定量检测：F=K﹒I0﹒φf﹒C☆其它（略）★高端生化研究：☆

4、分子相互作用研究；☆代谢动力学跟踪；☆显微成像（物理迁移与化学衍化的原位“显迹”）西北大学基础化学实验2.1实验原理R★在近中性的水溶液HOCH2OH中有较强的荧光发射:（323nm/392nm附近）H3CN★在碱性介质中不稳定R=CH2NH2,CH2OH,CHO.VB6的化学结构★易发生光降解西北大学基础化学实验１、试液配制２、VB6的荧光光谱的绘制３、标准工作曲线的制作４、未知液的配制西北大学基础化学实验☆注射液的移取与稀释☆系列标液的测定顺序☆即放即测，防光降解☆荧光仪的开关机顺序西北大学基础化学实验1.从荧光光谱

5、图上读出最大激发（λex）和发射波长（λem）2.用标准工作曲线法算出所配实测试液的浓度3.计算注射液中维生素B6的含量，病计算测定量占标示量的百分数西北大学基础化学实验