组织培养所需的实验条件和器具.doc

《组织培养所需的实验条件和器具.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、组织培养所需的实验条件和器具图片怎样才能发上来？请帮助！一、植物组织培养全过程：体器织离物组胞脱分化植物体二、植物组织培养常用的设备和器材、缓冲间，是组织培养实验所必1、培养室：包括准备室、洗涤灭菌室、无菌操作室、培养室须具备的基本条件。2、仪器设备：主要有超净工作台、冰箱、水浴锅、高床蒸汽灭菌锅、烘箱等。超净丁作台高压蒸汽灭菌锅水浴锅3.实验常用用具培养容器试管用于茎尖、花药、幼胚培养。一般要求试管口径要大，长度稍短，便于操作，以20inm*150inin.25mm*1SOnini.0nun*200nim为宜。三角瓶是植物组织培养中最常用的培养容

2、器，适于各种培养。接种外植体时多用容积为50毫升的二角瓶，一般实验用100亳升的三角瓶,生产育苗多用150毫升的三角瓶,液体振荡培养用300毫升以上的大三角瓶。优点是瓶口小，瓶底大，培养面积大，受光好，易放置，不易失水，培养效果好。缺点是价格较贵，易破损。果酱瓶或罐头瓶用于纽培苗的大議繁殖，生产屮应用较多的是200飞00亳升的果酱瓶或罐头瓶。优点是成本低，瓶口大，操作方便，透光好，空间大，培养材料生长健壮。但培养基容易失水，污染率较高。培养川L用于无菌材料分离、无菌发芽、单细胞固体平板培养、胚和花药培养、滤纸灭菌等。常用的观格有60mm>90mm和

3、120mm□兰花瓶主要用于蝴蝶兰、大花蕙兰等兰科花卉组培苗的继代培养。犁料容器优点：重量轻，运输方便，清洗过程屮不会损耗；缺点：不易清洗,透光不好，壁上会有水珠,植物生长效果不是很好，用久了会变毛，价格贵。封11材料为防止培养基干燥和污染杂菌，培养容器瓶口盂要一定的封门材料包扎。可用牛皮纸、硫酸纸、耐高温聚丙烯塑料，用线绳或耐高温橡皮筋捆扎，或用塑料瓶盖。玻璃器I1IL试剂瓶用于各种试剂、母液的存放，有广口和细口之分，有白色和棕色之分。见光易分解的药品用棕色瓶保存。烧杯用于配置各种母液和培养基。量筒配制各种溶液及培养基是测量用。容量瓶用于配制各种溶

4、腋时定容用。移液管（吸管）用于吸取各种母液和植物生长调节剂，有条件的可用微量可调移液器。接种器械很了有直锻和枪徐之分，接种和转移材料常用枪银，枪锻腰部弯曲，使用省力，枪银规格有16伽、20cmx23cmx26cm、30cnu剪刀有直剪和弯剪之分，用于剪取植物材料、茎段，进行继代培养的转接。解剖刀用于切割植物材料。其他工具包括接种针、接种铲等，用來接种花药或转移植物组织。三、常用药品组织培养所需药品主要用于培养基的配制，也有部分用于消毒，主要有以下几类:类别药品作用消毒药品次氯酸钠、次氯酸苗、双氧水、漂口将片、渓水、硝酸银等。消毒无机盐类KNOj、M

5、gSO4・7山0、NUNO"KHJU>CaCl2・2戌0、Fe2(SOJ3、NaJIPO.,.CuSO八NaNO(、NsSCM、ZnS(h、MnSO,・1山()、MnCl2・2山0、KI、11出(h等。无机盐是供外植体吸收的基木营养成分，各有不同作用,如N、P影响蛋白质的合成,Cd、K、S、Mg影响酶活性等。有机化合物蔗糖、维生索类、肌醉、氨基酸等。其中裁糖是不可缺少的碳源，也是渗透压调节物质。维生索的主要作用是促进细胞分裂和诱导器官分化。氨基酸是蛋白质组成成分，也是有机氮源。植物生长调节剂生长索类□引喙乙酸（IAA）、茶乙酸（NAA）、2,4—D

6、和U引味丁酸（1BA）02,-1-D有利愈伤组织生长，NAA、IAA.1BA有利于器官分化。细胞分裂索类激动素（KT）、6—节基腺喋吟（BA）、玉米索（ZT）等。其作用是促进细胞分裂与分化，其中KT能明显促进芽的分化而抑制根的形成。赤霉素类以GA,运用最广泛有促进不定芽和幼株伸长的作用。有机附加物人T合成和天然的台机物，常出的台酵母提取物、椰乳、果汁等及相应的植物组织浸出液。对细胞和组织的增殖和分化有一定促进作用。此外琼脂在组培中作为凝固剂，是外植体的支持体，常用浓度为0.5—1%。水培养基用水原则上使用蒸诸水，去离子水等。四、实验条件1、光照光照

7、是组织培养屮的重要外界条件Z—，它对外植体生长和分化有很大的影响。光照对组织培养的影响主要表现在光周期、光照强度（光强）和光质这三个方面。温度最重要的作用是决定呼吸的速度和控制植物组织代谢过程的化学反应。在植物组织培养屮，不同植物繁殖的最适温度不同，大约为23〜28°C之间，但也有不少例外，差异比较大。通常低于15°C吋，培养的外植体组织生长缓慢或出现停滞，但高于35°C对生长也不利。在实际工作屮，在考虑某种培养物的温度要求时，也应考虑原植物的生态环境所处温度条件,如生长在高海拔和较低温度环境的植物，则培养的环境温度可适当低些。3、湿度植物织织培养

8、屮的湿度影响主要有两个方面：一是培养容器内的湿度条件，二是培养室的湿度条件。培养容器内的湿度主要受培养基的影响，相对湿度可