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时间:2020-03-23
《白血病患病儿童血浆中砷化合物存在形态的研究.pdf》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第41卷分析化学(FENXIHUAXUE)来稿摘登第4期2013年4月ChineseJournalofAnalyticalChemistry606~607DOI:10.3724/SP.J.1096.2013.21149白血病患病儿童血浆中砷化合物存在形态的研究舒晓亮钟静霞李雪梅。康凯柳先丽蔡东联4(同济大学附属东方医院,上海200120)(同济大学附属同济医院,上海200065)(中国科学院生物物理研究所,北京100101)(第二军医大学长海医院,上海200433)1引言微量元素参与调控核糖核酸及蛋白的合成,从而影响细胞的增殖和分化,体内微量元素及其代
2、谢产物变化与白血病的发生、发展密切相关”,因此准确分析微量元素代谢产物的化学形态是研究微量元素生物效应的基础,对揭示微量元素对白血病的影响有积极意义。高效液相色谱(HPLC)一电感耦合等离子体质谱(ICP.MS)联用是元素形态分析的首选方法。本研究运用HC1提取血浆中As的化合物,采用HPLC和ICP—MS联用技术对白血病患病儿童的血浆砷(As)化学形态进行了分析,明确其中砷化合物的存在形态及其生物学效应。2实验部分2.1仪器与试剂7500a型ICP—MS和1100型HPLC(美国Agilent公司);HamiltonPRP—XIO0阴离子交换色谱柱(
3、250mmx4.1mmX10m,瑞士HamiltonReno公司);Milli—Q超纯水处理系统(美国Milli—pore公司)。(NH4)2CO3,NH4NO3,Na2SO3,KI,HC1,N%S,CH3OH(分析纯,德国Sigma—Aldrich公司);超纯水(电阻率18.2MQcm)由Milli.Q超纯水系统制得。标准物质NRCC—TORT-2由AsI,、As:0,(美国AlfaAesar公司)、二甲基胂酸(DMA,美国AcrosOrganics公司)、甲基胂酸(MMA)、砷胆碱(AsC)和砷甜菜碱(AsB,清华大学)组成,砷化合物标准溶液避光保
4、存在4℃环境。2.2血浆砷化合物形态的浸提白血病患病儿童300人,年龄10.32~2.78岁;健康儿童6o人,年龄9.58~2.52岁;采静脉血1mL至加有肝素试管内;取上清血浆,置_20℃冷冻箱保存,检测时取0.2mL解冻血浆样品,放入试管中,加入10mL1mol/LHC1,置60℃水浴24h,浸出砷化合物,充分振摇,使血浆样品砷化合物充分浸提,用PET瓶取3mL加超纯水定容至10mL,用于砷化合物分析,同样方法检测标准参考物中的砷化合物。3结果与讨论3.1砷形态分析方法评价本研究对砷化合物标准物处理后进行测定,结果表明,标准物的参考值和测定值非常相
5、近,证明本方法有可靠的准确性;加标后砷化合物回收率介表l血浆砷形态分析方法学确证(n=3)于99.6%~113.5%。本研究采用逐级稀释法测定了Table1Analyticalvalidationforarsenicspeciationinplasma(n=3)色谱分析法的检出限,6种砷形态的检出限介于0.5—1.0L之间(表1)。3.2血浆As化合物态分析本研究对砷化合物标准样品用HPLC-ICP—MS分析方法测定(图1),由图1a可见,在本实验条件下,AsC,AsB,As∞,DMA(dimethy1.arsinicacid),MMA(monomet
6、hylarsenousacid)和As(V)AsC:Arsenicchaline;AsB:Arsenobetaine;DMA:Dimethylarsinicacid;MMA6种砷化合物实现了完全分离。与标准参考物质TORT-2Monomethylarsenousacid.进行提取分析色谱图lb对比可见,增加了As0町9和甲基砷酸(MMA),表明HPLC—ICPMS方法对分析砷化合物形态的准确性高。本实验运用HC1浸出儿童白血病血浆样品中砷化合物,处理后直接进行HPLC-ICP—MS测定,得色谱图2c;比较健康儿童血浆样品色谱(图2a)及砷化合物的标准物
7、色谱(图2b)发现,无机As(、7)离子峰面积最大,没有显现典型的AsB离子峰面,表明儿童白血病血浆砷化合物的主要存在形态是无机As(V),有机AsB存在形态少。砷化合物的毒性以半致死量LD50计,依次为HAs>As~)>A8(V)>MMA(甲基酸)>DMA(二甲基砷酸)>TMAO(三甲基砷氧)>AsC(砷胆碱)>AsB(砷甜菜碱)J,有机砷毒性较小,无机砷毒性最大。研究证实,机体内砷经过代谢主要以2012一l1—13收稿;2013-01-30接受本文系上海市科技发展基金(No.074119048)资助项目十E—mail:zjxl2191@sina.c
8、orn第4期舒晓亮等:白血病患病儿童血浆中砷化合物存在形态的研究∞d3客uB口uBD《几乎无毒
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