核-壳型白藜芦醇分子印迹微球研制及应用.pdf

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1、第38卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究简报第1期2010年1月ChineseJournalofAnalyticalChemist~129～132核一壳型白藜芦醇分子印迹微球研制及应用张明磊张朝晖，刘丽张立吉聂丽华(吉首大学化学化工学院，吉首416000)(化学传感与计量国家重点实验室，长沙410082)摘要以表面修饰乙烯基团的SiO，微球为基体，白藜芦醇为模板分子，丙烯酰胺(AA)为功能单体，乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA)为交联剂，采用表面印迹技术制备核一壳型白藜芦醇印迹微球。采用红外光谱(IR)、扫描电子显微镜(SEM)对该分子印迹微球进行

2、表征，结果表明，SiO表面成功接枝一层厚度为200Ilnl的印迹聚合物，该印迹微球颗粒分散均匀。采用高效液相色谱技术对印迹微球的吸附性进行研究表明，此印迹微球具有良好的识别性能，利用Scatchard模型分析得出印迹微球的最大吸附量分别为Q⋯=9．087mg／g和Q⋯=13．80mg／g。此印迹微球成功用于分离虎杖提取液中白藜芦醇。关键词分子印迹微球；白藜芦醇；吸附性能；核一壳型1引言近年来，新型印迹技术不断涌现，包括采用溶胶．凝胶技术进行本体聚合¨』，在硅胶表面进行表面聚合。前者聚合物存在模板分子包埋过深、难以洗脱、形状不规则、机械性能低等缺点；后者的

3、表面印迹材料的大小可控，颗粒均匀，容易洗脱，尤其通过控制表面聚合壳层的厚度，可有效减少包埋现象。虎杖系蓼科属多年生草本植物，具有祛风利湿、散瘀定痛、止咳化痰的作用，主要含有蒽醌类和芪类化合物，其中芪类成分白藜芦醇(Resveratro1)具有抗癌、抗氧化、抗自由基、抗细菌和真菌等作用。目前，提取分离自藜芦醇的方法主要有溶剂提取和酶法提取及印迹技术。向海燕等以溶胶一凝胶法合成白藜芦醇印迹聚合物，但是其印迹聚合物模板分子包埋过深，难以洗脱，粒径不规则、不均匀。为了克服这些缺陷，本研究以SiO微球为载体，通过接枝乙烯基三甲氧基硅烷(VTMOS)，在SiO微球表

4、面引入双键，合成核一壳型的白藜芦醇分子印迹微球，并用于分离虎杖提取液中的白藜芦醇。2实验部分2．1仪器与试剂LC一2010AHT型高效液相色谱仪(13本岛津公司)；WGH一30A型双光束红外分光光度计(天津港东科技发展有限公司)；KQ-250E型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；LG10．2．4A台式高速离心机(北京医用离心机厂)。正硅酸乙酯(TEOS，Sigma公司)；丙烯酰胺(AA，分析纯)；白藜芦醇(标样，中国药检所)；乙二醇二甲基丙烯酸酯(EGDMA，Sigma公司)；偶氮二异丁腈(AIBN，分析纯)；乙烯基三甲基硅烷(VTMOS，Sigm

5、a公司)；乙腈(色谱纯)；乙酸、无水乙醇、氨水、HC1(分析纯)；虎杖(采自湖南张家界)粉末。2．2印迹微球的制备2．2．1SiO：微球的制备向装有49．5mL乙醇的烧瓶中加入2．0mL氨水、6．3mL蒸馏水和2．23mLTEOS，室温下以700r／min的速度搅拌，反应12h。收集产品，用乙醇冲洗，放人真空干燥箱中干燥，备用。2．2．2SiO2微球的表面修饰称取SiO：微球2．0g，加入8．0mol／LHC160．0mL，60℃回流12h，过滤，滤饼用蒸馏水洗涤至中性后，140qC下干燥8h，即可得表面活化的SiO，微球。取0．5g表面活化的SiO微球

6、，分散于10．0mL50％乙醇的水溶液中，加入0．75mLVTMOS，50cc下反应24h。硅烷化后，用乙醇在超声下洗去未反应的VTMOS，然后于100oC下干燥3h，使VTMOS与SiO表面的羟基充分交联键合，得到乙烯基修饰的SiO微球(VTM．SiO)。2009-06-02收稿；2009-07-31接受本文系湖南省自然科学基金(No．08JJ4004)，湖南省教育厅优秀青年项目(No．07B061)，化学生物传感与计量国家重点实验室开放基金以及湖南省大学生创新基金资助}E—mail：zhaohnizhang77@hotmail．tom分析化学第38卷

7、2．2．3白藜芦醇分子印迹微球(MIPs)的制备[3取200mgVTM．SiO颗粒分散于100mL乙腈溶液中，加入170mg(2．40mmo1)AA，1．83mL(9．2mmo1)EGDMA，300rag(1．3mmo

8、)白藜芦醇，和100mg(0．6mmo1)AIBN，在冰水浴下通入氮气10min。在50℃下聚合6h，然后升温至6O℃下再聚合24h，控制搅拌速度为300r／min。产物在85℃下再反应6h，沉淀，最后用乙腈和乙醇洗涤，120qC下干燥，将收集的白藜芦醇印迹微球(MIPs)用(甲醇)：(乙酸)=9：1混合溶液在索式提取器中反复洗涤24h除

9、去模板分子，120℃下干燥。非印迹微球(Nonimprintedpolymers