脂质组学技术方法的建立及其应用研究.pdf

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1、U"rsityofS‘ndTechnolog)ofChinaUniversityotcIenceandeCl3noloqyOt11naAdissertationformaster’SdegreeAThesisonLipidomicsStudy：Establishmentofthetechnique&methodforlipidc"anditsApplicati妇omicsanitsllCatlonlAuthor’SName：Speciality：Supervisor：Finishedtime：JiaojiaoMaOaCellBiologyProf．FuquanYangSeptember30，

2、2012中国科学技术大学学位论文原创性声明本人声明所呈交的学位论文，是本人在导师指导下进行研究工作所取得的成果。除已特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含任何他人已经发表或撰写过的研究成果。与我一同工作的同志对本研究所做的贡献均已在论文中作了明确的说明。作者签名：刍签殓中国科学技术大学学位论文授权使用声明作为申请学位的条件之一，学位论文著作权拥有者授权中国科学技术大学拥有学位论文的部分使用权，即：学校有权按有关规定向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅，可以将学位论文编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。本人提交的电子文档

3、的内容和纸质论文的内容相一致。保密的学位论文在解密后也遵守此规定。口公开口保密(——年)作者签名：墨堑煎一一签字日期：功12圭!l旦5B导师签名：签字日期：摘要脂质组学就是对细胞、组织、生物体中的脂质组成、含量，以及与其相互作用的分子进行全面系统的分析和鉴定，了解脂质的结构与功能，进而揭示脂质代谢与细胞、器官乃至机体的生理、病理过程之间的关系的一门学科。脂质有许多重要的生物学功能，对其进行研究的脂质组学作为代谢组学的一个分支，受到越来越多的关注。脂质组学的快速发展主要是得益于现代分离技术和质谱技术等分析鉴定技术日趋成熟，从而使我们可以对生物样品中的脂质进行全面的定性和定量分析。本文第一章对脂

4、质组学研究进展进行了综述，介绍了常用的脂质检测分析方法和质谱的基本原理。第二章介绍了人血浆脂质组学技术方法的初步建立。对现有的两种脂质提取的溶剂体系进行了进一步分析比较，最后经综合考虑选定甲基叔丁基醚(MTBE)／甲醇体系作为以后脂质提取的方法。论文第三章在之前实验的基础上系统开展了对模式生物线虫脂质组学的研究，包括定性和定量两个方面的分析。秀丽隐杆线虫是生物研究中一种非常理想的模式生物，尤其是在发育、遗传学、神经生物学、信号转导、老化等领域。脂质组的定性、定量分析有助于促进从功能基因组学的角度研究线虫的代谢途径。本章介绍了用MTBE／甲醇提取方法，使用TSQ通过前体离子和中性丢失扫描模式对

5、N2和eat一2两种线虫的脂质组进行分析，用LipidXplorerVl．2．3对得到的质谱数据进行处理。最后共鉴定到磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、溶血磷脂酰胆碱(LPC)等12类脂质，其中N2鉴定到318个，eat一2鉴定到317个脂质分子，对其中的一些脂质进行了定量的分析，并在此基础上系统的比较了两种线虫的脂质组成，找到了一些有差异的脂质分子。在对线虫的脂质组进行全面分析的同时，我们也基本上完成了脂质分析方法的建立。本文的研究目标是建立一个包括鸟枪法脂质组学和定向串联质谱(MS／MS)的高通量的分析方法，可以对线虫中的脂质分子进行全面的定性、定量分析，从而进一步系统的对线虫的

6、脂质代谢进行研究。在这样一个脂质分析平台下，我们不仅可以对线虫的脂质进行分析，而且可以把目摘要光聚集到疾病相关的脂质组分析。关键词：脂质；脂质组；脂质组学；质谱；串联质谱；鸟枪法ⅡAbstractABSTRACTLipidomicsisasubjectthatanalysisandidentifyallthelipidsandthemolecularsintactingwiththemincellsandotherexperimentmaterialsandstudythestructureandfunctionoflipids，thenexposetherelationshipoflipi

7、dmetabolismandthephysiologicalandpathologicalprocessincell，organandbiology．Asanimportantbranchofmetabolomicsmoreandmoreresearchersfocusonlipidomicsthatisbecauseoflipidshavemanyimportantbiologicalfunctions．T