绿原酸含量测定(紫外分光光度法).doc

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1、绿原酸测定(紫外分光光度法)绿原酸的含量测定方法有许多种。由于许多物质同绿原酸分子结构相似,同存于一种药材或制剂中。因此在进行含量测定时常难以分离。常用分析方法有紫外分光光度法(UV)、高效液相色谱(HPLC)法等。这些方法要么难以完全分离待测物质，要么易受干扰，或者分析时间长、效率低。现在在中药成分分析中开始采用一种新技术即高效毛细管电泳(HPCE)技术。它具有高分离效率、分析时间短、进样量少、低检测限和重现性好等特点。但由于在中药材的成分分析中才刚应用，效果如何还有待评价。1.标准曲线的绘制:精密称取绿原酸标准样品?mg（0.25mmol），用95%乙醇

2、溶解，转移到250ml容量瓶中，加95%乙醇到刻度，混匀。此溶液浓度为1μmol/mL。精密吸取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1mL到25ml容量瓶中，加95%乙醇到刻度，混匀，此为标准系列溶液。在330nm处测定吸光度，以绿原酸标准品的浓度为横坐标，以其吸光度为纵坐标绘制标准曲线，并求出相应的回归方程。　　2.样品中绿原酸含量的测定（1）提取液的制备:准确称取干物质1g左右，置于250ml锥形瓶中，量取约50ml95%的乙醇溶解样品，并置于85℃的恒温水浴箱中，4h。放置、冷却至室温，过滤，然后加95%的乙醇将提取液定容至250ml容量瓶，待用。

3、（2）含量测定:准确吸取样品提取液5ml于25ml容量瓶中，加95%的乙醇稀释到刻度，得到待测样品液。以95%的乙醇作空白，在330nm处测定吸光度，由标准曲线计算出待测样品液浓度。绿原酸标准液（mL）0.10.20.40.60.81.0绿原酸浓度（μmol/L）0.40.81.62.43.24.0吸光值3.绿原酸含量计算：绿原酸含量＝C×5×M/干物质重C:由标准曲线查得的浓度