课题3　血红蛋白的提取和分离.pptx

《课题3　血红蛋白的提取和分离.pptx》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、课题3血红蛋白的提取和分离组成元素C、H、O、N、S等等氨基酸脱水缩合多肽折叠盘旋蛋白质一、蛋白质的特性基本单位结构组成氨基酸蛋白质的相对分子质量在10000~1000000之间，且各有差异。相对分子量思考1分离生物大分子的基本思路是什么？选用一定的物理或化学的方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。思考2蛋白质的分离和提取的原理是什么？根据蛋白质各种特性的差异，如分子的形状和大小、所带电荷的性质和多少、溶解度和吸附的性质和对其他分子的亲和力等等，可以用来分离不同蛋白质。纸层析法利用在滤纸上不同种的分子运动速率不一样而出现了颜色分层现象的方法。层析法/色谱法利用在某载体上，不同种

2、的分子运动速率不一样，而出现了颜色分层现象的方法。载体：滤纸、凝胶柱等二、凝胶色谱法（分配色谱法）：1、凝胶：一些微小多孔的球体如葡聚糖、琼脂糖2、原理：当不同的蛋白质通过凝胶时，相对（）的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程（），移动速度（），而（）的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在（）移动，路程（），移动速度（），相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。相对分子质量较小较长较慢相对分子质量较大凝胶外部较短较快洗脱：从色谱柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。混合物上柱洗脱大分子流动快小分子流动慢收集大分子收集小分子1、概念：在一定的范围内，能对抗外来少量强酸、强碱或稍加

3、稀释不引起溶液PH发生明显变化的作用叫做缓冲作用，具有缓冲作用的溶液叫做缓冲溶液。三、缓冲溶液：思考：说出人体血液中缓冲对。NaH2PO4/Na2HPO4H2CO3/NaHCO3思考：在血红蛋白整个实验室中用的缓冲液是什么？它的目的是什么？使用的是磷酸缓冲液，目的是利用缓冲液模拟细胞内的pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于观察（红色）和材料的科学研究（活性）定义：在外加电场的作用下，带电粒子在电场的作用下发生迁移的现象。四、电泳：粒子运动方向：向与所带电荷相反的电极F电场力=qE又∵F=maV=at∴v=(q/m)×Et-在不考虑粒子的形状前提下，一定的电场强度、一定的时间内

4、，粒子的运动速度与其质量和带点情况相关联∴在电场中，粒子的带电量越大、颗粒越小、形状越接近于球形，运动速度越快。2、常见方法琼脂糖凝胶电泳聚丙稀酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法