选修1生物技术实践模块(学生复习版).ppt

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1、选修实验复习备考一、考纲解读实验要求选修三基因工程（1）能独立完成所列的生物实验，包括理解实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握相关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合运用。（2）具备验证简单生物学事实的能力，并对实验现象和结果进行解释、分析和处理。（3）具有对一些生物学问题进行初步探究的能力，包括运用观察、实验与调查、假说演绎、建立模型与系统分析等科学研究的方法。（4）能对一些简单的实验方案做出恰当的评价和修订。DNA的粗提取与鉴定选修一微生物的利用（1）微生物的分离和培养（2）某种微生物数量的测定（3）培养基对微生物的选择作用（4）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生

2、物在其他方面的应用酶的应用（1）酶活力测定的一般原理和方法（2）酶在食品制造和洗涤等方面的应用生物技术在食品加工及其他方面的应用（1）植物的组织培养（2）蛋白质的提取和分离（3）PCR技术的基本操作和应用注意选修实验与必修内容的联系选修内容必修内容选修三基因工程DNA的粗提取与鉴定选修一微生物的利用（1）微生物的分离和培养（2）某种微生物数量的测定（3）培养基对微生物的选择作用（4）利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用种群密度的增长曲线血球计数板的应用酵母菌、醋酸菌等微生物的代谢特点酵母菌的呼吸类型酶的应用（1）酶活力测定的一般原理和方法（2）酶在食品制造和洗涤等方

3、面的应用酶的本质，影响酶活性的因素细胞壁的成分生物技术在食品加工及其他方面的应用（1）植物的组织培养（2）蛋白质的提取和分离（3）PCR技术的基本操作和应用细胞分化，细胞全能性蛋白质的特点，血红蛋白的结构等DNA复制的条件一、微生物的实验室培养（一）培养基人们按照微生物对营养物质的不同需求，配置出供其生长繁殖的营养基质称培养基一般的培养基均需要碳源、氮源、无机盐和水等培养基的基本成分液体培养基（一般用锥形瓶盛装）固体培养基（一般用试管或培养皿盛装），在液体培养基的基础上再添加琼脂。培养基的种类2、理解培养基的种类及应用（适当补充）按物理状态不同划分固体培养基液体培养基半固体培养基按化学

4、组成不同划分：合成培养基/天然培养基按用途不同划分鉴别培养基选择培养基加入青霉素的培养基分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基分离金黄色葡萄球菌只有尿素作为惟一氮源的培养基分离出分解尿素的细菌不加氮源的无氮培养基分离固氮菌只有纤维素作为惟一碳源的培养基分离分解纤维素的细菌加入青霉素等抗生素的培养基分离导入了目的基因的受体细胞选择培养基做一些适当的补充（二）无菌技术无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法技术。获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，无菌技术就是防止杂菌污染的操作技术。灭菌方法适用对象所需条件灭菌时间灼烧灭菌接种金属用具、试管口、瓶口在酒精灯火焰的

5、充分燃烧层灼烧直至烧红干热灭菌能耐高温并需要保持干燥的玻璃器皿、金属用具等干热灭菌箱内，160～170OC中1～2h高压蒸汽灭菌培养基、实验器具等100kPa，121OC15～30min消毒无菌技术的种类灭菌使用较为温和的方法（酒精、紫外线）来杀死部分对人体有害的微生物。对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁消毒；将培养皿、接种用具进行灭菌；接种的过程要在酒精灯附近进行。使用较为强烈的理化因素杀死物体内外的所有微生物（包括芽孢和孢子）。基本过程：称量→溶化→灭菌→倒平板分离分解尿素的细菌：培养基中加入尿素为唯一氮源分离分解纤维素的微生物：培养基中加入纤维素为唯一碳源倒平板操作的讨论

6、1.培养基灭菌后要冷却到50OC时倒平板。用什么办法来估计培养基的温度？用手触摸锥形瓶，温度下降到刚刚不烫手时即可开始倒平板。2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？为什么？空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。（二）

7、纯化大肠杆菌微生物接种方法常见的有平板划线法和稀释涂布平板法。1.平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面（操作如教材18页图示）。在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。优点：可以观察菌落特征，对混合菌进行分离缺点：不能计数一般用于分离微生物的纯种1、为什么在操作的第一步以及划线之前都要灼烧接种环？在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环？操作的第一步灼烧接种