实验二、微量吸管.ppt

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1、实验二、微量吸管及计数板的使用一、微量吸管的使用【目的】掌握微量吸管的使用方法。【原理】利用微量吸管的虹吸作用吸取血液。【器材】微量吸管、乳胶吸头、一次性棉签、试管、试管架、采血针。【试剂】洗涤液：生理盐水。【标本】采集末梢血【操作】1．准备吸管及试管：2．加稀释液取试管1支，加生理盐水2ml。3．持管吸血4．拭净余血用干脱脂棉沿吸管口方向拭净余血，并检查血量是否达到规定刻度。5．释放血液将吸管插入含生理盐水的试管底部，慢慢排出吸管内的血液，再用上清液冲洗管内余血3次。二、改良牛鲍计数板的使用【目的】掌握改良牛

2、鲍计数板计数池的基本结构及使用方法。【原理】一定倍数稀释的血液或体液，混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的改良牛鲍计数板中，在显微镜下对所选择区域中的细胞进行计数，再乘以稀释倍数，即可换算成单位体积内的细胞数。【器材】1．改良牛鲍计数板及盖玻片2．其它试管、试管架、吸管、微量吸管、乳胶吸头、绸布、显微镜。【标本】同上【操作】1．准备计数板先用流水冲洗计数板和盖玻片除去所有残留物，然后用乙醇洗涤，最后用绸布拭净，采用推压法从计数板下缘向前平推盖玻片，将其盖在计数池上。2.先用低倍镜(10倍物镜)观察，通过调节显

3、微镜光栅减少光线进入量以便观察整个计数板的结构(大、中、小方格)及特征。再用高倍镜（40倍物镜)观察红细胞计数区域。3.充池充分混匀溶液，用微量吸管将稀释血液滴入计数板和盖玻片交界处，利用虹吸作用让液体顺其间隙充满计数池；同样方法再给另一侧计数板充池。4．静置计数板充池后应平置于桌面上静置3min，待细胞下沉后计数。5.计数原则需遵循一定的方向逐格进行，以免重复或遗漏。对压线的细胞采用数左不数右，数上不数下的原则。记录所数5个中方格的红细胞数和4个大方格的白细胞数。血细胞计数板的构造24×20×0.6mm计数池

4、划线1mm1mm计数池划线美国国家标准局（NBS）1941年规定：计数池大方格每边长度的误差应在±1%内（10±0.01mm）;血盖片与计数池间缝隙深度应在±2%以内(0.1±0.002mm)。计数池的参数区域边长（mm）面积（mm2）深度（mm）体积（mm3）计数池390.10.9大方格110.10.1计WBC中方格0.250.06250.10.00625计RBC中方格0.20.040.10.004计RBC小方格0.050.00250.10.00025