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时间:2020-09-13
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1、实验一光学显微镜、微量吸管及改良牛鲍计数板使用.一、光学显微镜使用与维护.【目的】掌握显微镜的操作规程;了解光学显微镜的结构及原理;了解显微镜的保养方法。.(一)显微镜的结构光学显微镜(以下简称为显微镜),是用来观察肉眼看不见的微小生物结构的。虽然电子显微镜已经问世,但是,在目前一般的科学研究和教学中,显微镜仍然是重要的、较为精密的生物观察仪器。为了正确操作、妥善保管和维护显微镜,使之延长使用年限,作为生物学工作者,必须了解显微镜的结构和功能。.机械部分1.镜筒是一个金属长筒,筒口上端安装目镜
2、镜头,下端装有镜头转换器和物镜镜头。2.镜头转换器是安装在镜简下端的一个旋转圆盘。镜头转换器上有3--5个孔,分别装有低倍或高倍物镜镜头。3.粗准焦螺旋位于镜臂的下方,可以转动,以便使载物台能上下移动,从而调节焦距。4.细准焦螺旋位于粗准焦螺旋外方,它的移动范围较粗准焦螺旋小,可以细调焦距。5.镜座位于镜臂下方,用以稳固和支持镜身。.5.镜座位于镜臂下方,用以稳固和支持镜身。6.镜臂上接镜筒,下连载物台,呈弓曲形。为显微镜上的手握之处。7.载物台是放置玻片的平台。其中央具有通光孔,载
3、物台上有金属夹片夹,是用来卡住载玻片的夹子,转动左、右移动尺螺旋还可使切片在载物台上移动。.光学部分1.目镜是插在镜筒顶部的镜头,是由一组透镜组成的,它可以使物镜成倍地分辨、放大物像,例如5×、10×、15×和20×。2.物镜安装在物镜转换器的孔上,也是由一组透镜组成的,能够把物体清晰地放大。物镜上刻有放大倍数,例如(4、10、25、40、100×)等。显微镜的放大倍数是目镜倍数乘以物镜的倍数。3.底光源位于底座上,开关位于底座侧方。光线的强度可以调节。.4.在镜柱前有一个聚光器调节螺旋,它
4、可以使聚光器升降,用以调节光线的强弱,下降时明亮度降低,上升时明亮度加强。5.虹彩光圈又称可变光阑,由多数金属片组成,在较高级显微镜上具有此装置。使用时移动其把柄,可控制聚光器透镜的通光范围,用以调节光的强度。虹彩光圈下常附有金属圈,其上装有滤光片,可调节光源的色调。..一、使用方法1.观察前的准备(1)置显微镜于平稳的实验台上,镜座距实验台边沿约为一寸左右。镜检者姿势要端正,一般用左眼观察,右眼便于绘图或记录,两眼必须同时睁开,以减少疲劳,亦可练习左右眼均能观察。(2)显微镜是光学精密仪器
5、,在使用时要特别小心,使用前要熟悉显微镜的结构和性能,检查各总零件是否完好无损。镜身有无灰尘,镜头是否清洁,做好必要的清洁和调整工作。(3)调节光源 对光时应避免直射光源,因直射光源影响物像的清晰,损坏光源装置和镜头,并刺激眼睛。晴天可直接用窗外的散射光,如明暗天气,可用8-30W日光灯或显微镜灯照明.调节光源及光照的一般步骤:将低倍物镜旋至镜筒下方,旋转粗调节轮,使镜头和载物台距离约为0.5cm左右。上升聚光器,使与载物台表面同样高。否则使用油镜时光线较暗。左眼看目镜,调节反光镜镜面角度(反光
6、镜有凹平两面,光线较强自然光源,宜用平面镜;光线较弱的天然光源或人工光源,宜用凹面镜。)对光使全视野内为均匀的明亮度。凡检查染色标本时,光线应强;检查未染色标本时,光线不宜太强。可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调节光线..2.低倍镜观察。检查的标本须先用低信镜观察,因为低倍镜视野较大,易发现目标和确定检查的位置。(1)先将标本玻片置于载物台上,并将标本部位处于物镜的正下方,转动粗调节轮,下降物镜或上升载物台使物镜至标本0.5cm处。(2)左眼看目镜,同时反时针方向慢慢旋转粗调节轮,当
7、在视野内出现物象后,改用细调节轮,上下微微转动,直至视野内获得清晰的物象。然后认真观察标本各部位,确定并将需进一步要观察的部位移视野中央,准备用高倍镜观察。.3.高倍镜观察;将高倍镜转正至正下方,在转换接物镜时,需用眼睛在侧面观察,避免镜头与玻片相撞。然后由接目镜观察,再仔细调节光圈和聚光镜,使光线的明亮度适宜,同时再仔细正反两方向微转动细调节轮,直至获得清晰的物象后为止,找到最适宜于观察的部位。需进一步要观察的部位移视野中央,准备用油镜观察。.4.油镜观察:(1)上升聚光器,全开虹彩光圈(2)
8、用粗调节轮提起镜筒或下降载物台,转动转换器将油镜转至镜筒正下方。在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。右手顺时针方向慢慢转动粗调节轮使镜筒下降或载物台上升,与此同时,从显微镜的侧面观察使油镜浸入油中,直到几乎与标本接触时为止。注意不要压到标本,以免压碎玻片,甚至损坏油镜头。(3)从接目镜内观察,进一步调节光线,使光线明亮,再用粗调节轮将镜筒徐徐上升或将载物台徐徐下降,直到视野内出现物像为止,然后用细调节轮校正焦距。如油镜已离开油面而仍未见物象,必须再从侧面观察,将油镜降下,重复操作至物象看清为止。
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