艾叶燃烧物的抑菌作用.pdf

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1、[13]马瑶．针灸配合耳穴贴压治疗习惯性便秘60例临床观察及研究[D]．长春，长春中医药大学，2007．[14]李洁新，张蕾．针灸推拿治疗老年性便秘37例临床观察[J]．北京中医药，2008，27（2）：125-126．[15]龚建明．针药结合治疗功能性便秘30例临床观察[J]．江苏中医药，2009，41（12）：33-34．[16]高效样．针药结合治疗气血两虚型便秘68例疗效观察[J]．新中医，2006，38（1）：68-67．[18]肖坚．中药联合针灸治疗老年慢性功能性便秘30例临床观察[J]．中医药导报，2010，16（6）：90-91艾叶燃烧物的抑菌作用洪宗国杨梅（中南民族

2、大学药学院民族医药国家中医药管理局三级实验室武汉430074）【摘要】为了探索艾叶燃烧物不同组分的抑菌作用，采用贴片法测定它们对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌的抑菌性能，并测定5-叔丁基连苯三酚对四种菌的最低抑制浓度和最低杀菌浓度。结果表明：艾叶挥发油、5-叔丁基连苯三酚对四种实验菌均有较强的抑制与杀灭作用，燃烧物重组分、焦油对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌有较强抑制作用，水浸液只对金黄色葡萄球菌有抑制作用。5-叔丁基连苯三酚对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌的最低抑菌浓度分别为1.76%、3.10%、1.76%、10.45%。【关键词】艾叶挥发油；

3、艾叶燃烧物；抑菌作用；艾灸机制艾灸是中医的基本疗法。艾灸的作用机制是利用艾叶燃烧产生光热效应与化[1]学物质通过人体腧穴、经络调节人体生理功能，治疗疾病。其中艾叶燃烧物的作用有体表的抑菌作用，透皮和透穴作用，体内的通经活络活血化瘀作用等。其中对体表的抑菌作用目前相关研究主要集中在烟熏和燃烧混合物的抑菌作用方304[2]面，对其具体起抑菌作用的化学物质研究较少。我们提取艾叶挥发油，并燃烧艾叶分离出轻组分、重组分、焦油，并从重组分中分离得到5-叔丁基连苯三酚，从灰烬中获得结晶。选取大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和白色念珠菌为对象菌，采用滤纸片法测定了艾叶挥发油与艾叶燃烧物上述不

4、同组分的抑菌作用，并对具有较好抑菌效果的5-叔丁基连苯三酚测定了最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC)。1实验试剂、仪器及材料牛肉膏、蛋白胨，葡萄糖，琼脂粉等均为生化试剂，吐温80为化学纯，马铃薯为市售，NaCl，5-叔丁基连苯三酚（美国施瑞科技公司）为分析纯，。艾叶由湖北省蕲春县医药工作办公室提供，品种鉴定郭双喜。大肠杆菌(Escherichiacoli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)由中南民族大学工商学院实验室提供，白色念珠菌（Candidaalbicans）由湖北省人民医院提供。细菌培养用

5、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基:牛肉膏3g，蛋白胨10g,NaCl5g，琼O脂15g,蒸馏水1000mL,调pH7.2,121C灭菌20min。该培养基用于大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的培养。真菌培养用PDA培养基：马铃薯（200g），葡萄糖（20g），蒸馏水（1000mL），琼脂15～20g，pH自然。制备方法：马铃薯去皮，切成块煮沸30min，然后用纱布过滤，再加葡萄糖及琼脂，溶化后补足水O至1000mL。121C灭菌30min。2实验方法2.1样品的制备[3][4]用蕲艾油简式提取设备，以蕲艾油简式提取法提取挥发油。将艾叶制绒，暗火燃烧，用苯-甲醇混合溶液吸收燃烧产生的白烟

6、。蒸馏吸收液，母液为黑褐[5]色焦油状物质，即为重组分。燃烧艾绒，在玻璃漏斗壁上留下大量黑褐色焦油，用无水甲醇溶解，粗滤后再微孔有机滤膜过滤，进行蒸馏浓缩，得到褐色焦油。用甲醇（500mL）提取燃烧产生的艾烬（10g），提取3天。提取液粗过滤，微孔有机滤膜（孔径2μm）过滤后，蒸馏浓缩至50mL，放置于通风橱中12小时。有大量固体产生，过滤得到固体样品。用少量甲醇将固体淋洗3遍后干燥，将干燥的固体用少量的蒸馏水溶解，进行结晶，得到的晶体为白色立方晶系粗晶。经过305三次重结晶后，得到比较纯净的晶体。用75ml蒸馏水作为吸收剂，吸收艾烟10h，将吸收液粗过滤，再用孔径2μm微孔有机滤

7、膜精滤，得到艾烟水提取物。2.2样品溶液的配制量取蒸馏水0mL、10mL、20mL、30mL于4个小烧杯中，分别加入2mL的吐温80后，用磁力搅拌器搅拌至溶液透明。分别称取0.0400g艾油、重组分和焦油，每个样品各四份。分别用上述吐温80溶剂2mL溶解。观察是否可以完全混溶。实验结果表明吐温80与水的配比为2：20，三种样品均能很好的溶于溶剂，并且溶解后可以通过0.22μm孔径的无菌滤膜过滤，故采用该浓度作为样品配置浓度。分别称取0.0400g晶体和5-叔丁基连苯三