基因工程的原理及技术1.doc

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1、基因工程的原理及技术1生物分子间特异性结合的性质广泛用于生命科学研究。以下实例为体外处理“蛋白质-DNA复合体”获得DNA片段信息的过程图。据图回答：（1）过程①酶作用的部位是键，此过程只发生在非结合区DNA，过程②酶作用的部位是键。（2）①、②两过程利用了酶的特性。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（3）若将得到的DNA片段用于构建重组质粒，需要过程③的测序结果与酶的识别序列进行对比，以确定选用何种酶。（4）如果复合体中的蛋白质为RNA酶聚合，则其识别、结合DNA序列区为基因的。（5）以下研究利用了生物分子间的特异性结合的有（多选）A.分离得到核糖体，

2、用蛋白酶酶解后提取rRNA“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）B.用无水乙醇处理菠菜叶片，提取叶绿体基粒膜上的光合色素[来源:中国教育出版网zzstep.com]C．通过分子杂交手段，用荧光物质标记的目的基因进行染色体定位“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）D．将抑制成熟基因导入番茄，其mRNA与催化成熟酶基因的mRNA互补结合，终止后者翻译，延迟果实成熟。【答案】（1）磷酸二酯，肽“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）（2）专一性（3）限制性核酸内切酶（4）启动子（或转录起始区）（5）A、

3、C、D【解析】（1）DNA酶作用的部位是DNA的磷酸二酯键，蛋白酶作用的部位是肽键。（2）①②过程利用了各种酶催化一种或一类化学反应的特性，即专一性。（3）DNA要构建重组质粒，需要用限制性核酸内切酶切割，再与质粒重组。（4）RNA聚合酶识别和结合在基因的启动子上，驱动基因转录。（5）蛋白酶能特异性的酶解蛋白质，分子杂交手段也是利用各物质分子结合的特异性，抑制成熟基因转录出的mRNA与催化成熟酶基因的mRNA碱基互补结合，也具有特异性，光和色素易溶于有机溶剂，与酒精并不是特异性的溶解，所以选ACD。[来源:z,zs,tep.co“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-1

4、3标记）m]【试题点评】本题考查了基因工程的想过知识，主要考查学生对知识的理解和应用能力，难度较小。2黄曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）回答下列问题：(1)AFB1属于类致癌因子。(2)AFB1能结合在DNA的G上，使该位点受损伤变为G'，在DNA复制中，G'会与A配对。现有受损伤部位的序列为，经两次复制后，该序列突变为。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012

5、-7-13标记）（3）下图为采用基因工程技术生产AFB1解毒酶的流程图据图回答问题：①在甲、乙条件下培养含AFB1解毒酶基因的菌株，经测定，甲菌液细胞密度小、细胞含解毒酶：乙菌液细胞密度大、细胞不含解毒酶．过程l应选择菌液的细胞提取总RNA，理由是②过程Ⅱ中，与引物结合的模版是③检测酵母菌工程菌是否合成了AFB1解毒酶，应采用方法。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）(4）选取不含AFB1的饲料和某种实验动物为材料，探究该AFB1解毒酶在饲料中的解毒效果。实验设计及测定结果见下表：[来源:中国教育出版网zzstep.com]据表回答问题：①本实验的两个自变

6、量，分别为。②本实验中，反映AFB1解毒酶的解毒效果的对照组是。③经测定，某污染饲料中AFB1含量为100μg/kg，则每千克饲料应添加克AFB1解毒酶．解毒效果最好．同时节的了成本。（5）采用蛋白质工程进一步改造该酶的基本途径是：从提高每的活性出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的序列。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）-19-【答案】(1)化学(2)（3）①甲甲菌液细胞的AFB1解毒酶基因已转录生成了mRNA，而在乙菌液细胞中该基因未转录②AFB1解毒酶基因的cDNA.③抗原-抗体杂交(4）①AFB1的有无和AFB1解毒酶的含

7、量。②B组（或B组+A组）③5(5）脱氧核苷酸序列。“汉水丑生的生物同行”超级群公益作品（汉水丑生2012-7-13标记）【解析】黄曲霉毒素B1（AFB1）存在于被黄曲霉菌污染的饲料中，它可以通过食物链进入动物体内并蓄积，引起瘤变。某些微生物能表达AFB1解毒酶．将该酶添加在饲料中可以降解AFB1，清除其毒性。[来源:中&国教&育出&版网](1)黄曲霉毒素B1（AFB1）是化学物质，AFB1属于化学类致癌因子。(2)AF