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1、内蒙古农业科技2014(5):98~101InnerMongoliaAgriculturalScienceAndTechnology转基因作物检测技术研究进展呼斯乐1222111,白晨,张惠忠,李晓东,菊花,王良,贾敢敢(1.内蒙古农业大学,内蒙古呼和浩特010019;2.内蒙古农牧业科学院,内蒙古呼和浩特010031)摘要:目前基因工程技术已经在多种农作物中得到应用和发展,随着转基因作物的不断增多,转基因产品的安全性问题引起世人的关注,因此需要建立快速、有效的转基因检测技术。文章对转基因作物检测技术的研究进展进行了综述,介绍了酶联免疫吸附法、蛋白
2、质杂交印迹技术、PCR技术、基因芯片、环介导等温扩增技术等在转基因检测中的最新应用情况,同时介绍了其他新型检测技术的研究概况。关键词:转基因作物;核酸;蛋白质中图分类号:S188文献标识码:A10.3969/j.issn.1007-0907.2014.05.048文章编号:1007-0907(2014)05-0098-04AdvancesoftheTransgenicCropsDetectionTechnologyHUSile1,BAIChen2,LIXiaodong2,ZHANGHuizhong2(1.InnerMongoliaAgricultu
3、ralUniversity,Hohhot010019,China;2.InnerMongoliaAcademyofAgricultural&AnimalHusbandrySciences,Hohhot010031,China)Abstract:Atpresent,geneticengineeringtechnologyhasbeenappliedanddevelopedinmanykindsofcrops,withtheincreasingofgeneticallymodifiedcrops,thesafetyofgeneticallymodifi
4、edproductshasattractedmoreandmoreworldwideattention,soitisnecessarytoestablisharapidandeffectivetransgenicdetectiontechnology.ThetransgenicdetectiontechnologiessuchasELISA,Westernblot,PCR,genechiptechnology,theloop-mediatedisothermalamplification,andsomenewdetectiontechnologyw
5、erefocusedoninthispaper.Keywords:Geneticallymodifiedcrops;Nucleicacid;Protein自1996年转基因作物被批准商业应用以来,转基因作物的测定法,对转基因玉米中的Bt表达蛋白进行定量检测。与酶标商品化种植得到迅速发展。目前商业化种植的转基因作物已有抗体相比,量子点具有吸收波长宽、发射波长窄和检测灵敏度高上百种,种植面积达到17500万hm2的特点,这种独特的光化学稳定性使其广泛应用于生物领域[6],这样使得转基因技术迅速。发展起来。至2013年共有59个国家和地区得到批准进口转基
6、酶联免疫吸附法具有快速、简便、费用低等特点,但其准确性易因作物,根据农业生物技术应用国际服务组织(ISAAA)统计,全受复杂基质的干扰,检测范围受限制。球共有29个国家种植转基因作物17500万hm2,比2012年增1.2蛋白质杂交印迹技术加了3%[1]。随着转基因作物种植面积的不断扩大,快速、有效的蛋白质杂交印迹技术(WesternBlot)是检测转基因作物外检测技术不但有利于转基因作物育种工作,而且节省了不少的源蛋白表达的经典方法,是一种蛋白质转移电泳技术,其原理是时间和成本。目前转基因检测方法主要是外源蛋白质检测和核把聚丙烯酰胺凝胶电泳分离的
7、目的蛋白原位固定于固相膜上,酸检测,包括酶联免疫吸附法、Westernblot检测、PCR技术、基再用高浓度蛋白质溶液温浴固相膜,然后用含有放射性标记或因芯片、环介导等温扩增技术等。酶标记的特定抗体进行杂交,使抗原-抗体特异性结合,最后通1蛋白质检测技术过放射自显影观察外源基因的表达。Westernblot具有从多克隆1.1酶联免疫吸附法抗体中检测出单克隆抗体,检测灵敏度高(可检出限为ng级)、酶联免疫吸附技术是利用抗原和抗体特异性结合,待受体反应均一性好、保存时间长等优点。Qiu等[7]采用Western杂交检标本和酶标抗体复合物结合,加入酶反应
8、底物后形成可以检测测转基因水稻中稻瘟菌蛋白激发子,结果表明,该蛋白的表达具的有色产物来进行检测,此技术已在转基因外源蛋白的