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时间:2020-03-23
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1、实验项目甘油三酯的测定(72-1)3学时一、实验目的掌握:血清甘油三酯(三酰甘油)测定的原理、操作方法和临床意义。二、实验原理2、3、4.用72-1型分光光度计测出红色化合物吸光度,再利用公式求出甘油三酯含量。三、实验器材与试剂(1)试管3支(2)水浴箱1台(3)试管架1个(4)洗耳球1个(5)微量五档可调移液器2支(6)刻度吸量管(5ml)1支(7)72-1型分光光度计1台(一)实验器材微量五档可调移液器使用方法:1.将吸嘴套在移液器头上轻轻转动,以保证密封。2.使用前应先将移液器吸液和排液几次,润洗吸
2、嘴和保持腔内外气压一致。3.选择量程。4.垂直地握住移液器,将按钮按到第一停止点,然后把吸嘴浸入到液面下2~3mm,再缓慢放松按钮,使之复位,等待1~2秒后,从液体中取出,并避免碰撞任何物体。5.将吸液嘴移至加样容器壁上,缓慢地把按钮按到第一停止点,等待1~2秒,再把按钮全部按下去,排尽液体后,吸液嘴应沿容器壁上滑动取出,再放松按钮,使之复位,即完成。6.最后,打掉用过的吸液嘴,调回最大量程,仪器放置好保存。72-1型分光光度计工作原理物质对光的吸收具有选择性,不同的物质都有各自的吸收波长。在一定波长下,
3、某物质的溶液对光的吸收强弱(吸光度A)与溶液的浓度C和液层的厚度L的乘积成正比,即遵循朗伯-比尔定律:A=K·C·L(K为吸收系数,对同一物质来说为一常数)使用方法:1.检查:指针位于“0”。2.打开电源,打开比色皿暗箱盖,预热20分钟。3.加样:夹毛面,擦干。4.放置好比色皿,选择波长、调灵敏度。5.反复调0、调100至稳定。6.合盖,读数,记录,取样,清洗,关闭仪器。1、血清(样本)2、蒸馏水3、工作液4、甘油三酯标准液(标本):2.26mmol/L(二)实验试剂四、实验内容和操作过程1、取3支干净试
4、管,分别标明测定(T)、标准(S)和空白管(O),然后按表加入试剂:加入物测定管T标准管S空白管O血清(ml)15标准液(ml)15工作液(ml)1.51.51.52、将样品混匀后,置于37℃水浴箱中水浴10min。3、用分光光度计在波长546nm处,以空白管O调零,分别读取两管吸光度值,记录测定管T、标准管S的吸光度值AT、AS。计算公式:甘油三酯(mmol/L)=×标准液浓度(2.26mmol/L)测定管吸光度AT标准管吸光度AS五、实验结果计算及分析【结果分析】经过计算得到的血清中甘油三酯浓度为多少
5、,是否在人体的正常范围内(空腹甘油三酯浓度为0.45~1.36mmol/L)。六、临床意义TG升高:1、随年龄增长有上升趋势,体重超标者。2、高脂血症、糖尿病、肾病综合症、动脉粥样硬化、甲状腺功能减退等。3、先天性脂蛋白脂酶缺陷,脂肪肝及其他肝病。4、妊娠后期,糖原累积病。TG降低:甲亢甲亢、肾上腺皮质功能降低、肝功能严重低下等。
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