临床医学毕业论文肾炎宁对lps诱导人肾小球系膜细胞增殖及细胞外信号调节蛋白激酶的影响.doc

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1、XX大学毕业论文肾炎宁对W诱导人肾小球系膜细胞增殖及细胞外信号调节蛋白激酶的影响姓名：2014年6月25日肾炎宁对LPS诱导人肾小球系膜细胞增殖及细胞外信号调节蛋白激酶的影响作者：王月华边东范焕芳郭登洲袁国栋【摘要】F1的探讨肾炎宁对人肾小球系膜细胞(HMC)细胞增殖及细胞外信号调节蛋白激酶(extracellularsignalregulatedproteinkinase,ERK)的影响。方法应用细胞培养技术，进行HMC培养，采取血清药理学方法，制备肾炎宁药物血清，利用脂多糖(LPS)为刺激因子，应用四呼盐(MTT)比色法和酶联免疫吸附试验(ELISA)

2、检测细胞的增殖和磷酸化ERK1/2的表达。结果肾炎宁可显著抑制HMC增殖，抑制率在12、24和48h分别为16.0%、15.4%、18.2%,LPS组磷酸化ERK1/2的含量与空白组比较明显升高(P0.05)；屮药组与空白组比较，磷酸化ERK1/2含量明显降低(P0.05)；LPS+肾炎宁组与LPS组比较，磷酸化ERK1/2表达明显降低(P0.05)。结论肾炎宁具有抑制正常培养条件及LPS刺激条件下磷酸化ERK1/2,从而发挥对肾小球硬化的治疗作用。【关键词】肾炎宁；系膜细胞培养；增殖；细胞外信号调节蛋白激稱【Abstract]ObjectiveToinv

3、estigatetheeffectofShenyanningontheexpressionofextracellularsignalregulatedproteinkinaseofhumanmesangialcells(HMCs).MethodsHMCswereculturedbyapplyingcellculturaltechnique.Theserumpharmacologicalmethodwasusedinthepreparationofshenyanningscrum.HMCproliferationwasdetectedbyMTT.ThcpER

4、K1/2expressionwasdetectedbyenzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)takinglipopolysaccharide(LPS)asstimulatingfhetor.ResultsShenyanningsignificantlyinhibitedHMCproliferation；andtheinhibitionratiosofmediumdosewere16.0%,15.4%and18.2%whenHMCwereculturedfor12,24and48h.ThecontentofpERK1/2i

5、nLPSgroupwasobviouslyhigherthanthatinblankgroup(PO.Ol),thatinshenyanninggroupwasobviouslylowerthanthatinblankgroup(P0.05).ThcexpressionofpERK1/2inLPScombinedShenyanninggroupwasobviouslylowerthanthatinLPSgroup(P0.01).ConclusionsShenyanningcouldinhibittheexpressionofpERK1/2inthecond

6、itionofnormalorLPSstimulation^whichmaybethemechanismofShenyanninginthedelayofglomcrularsclcrosis.[Keywords]Shenyanning；Mesangialcellculture；Proiferation:ExtracellularsignalregulatedproteinkinaseIgA肾病是Fl前最常见的原发性肾小球肾炎之一,15%〜20%的患者在确诊后10年内、30%〜35%的患者在确诊后20年内进入终末期肾衰竭(ESRF)(1〕。本病特征为弥漫性

7、肾小球系膜区免疫球蛋白沉积，并有肾小球系膜细胞(MC)增殖。MC分泌细胞因子及细胞外基质(ECM),参与肾小球炎症发展过程，促进肾小球硬化。抑制炎症状态下MC的增殖与分泌，在IgA肾病的治疗屮有重要意义〔2)。我们根据屮医理论，探究本病病因病机，提出“益气养阴化瘀祛湿法"，并依法组方肾炎宁治疗IgA肾病，临床取得了较好的疗效(3,4)。鉴于此，本研究试图通过观察肾炎宁对人MC(HMC)细胞外信号调节蛋白激酶(extracellularsignalregulatedproteinkinase,ERK)的影响，以探讨其临床药效及部分作用机制。1材料与方法1」材

8、料LPS(美国Sigma公司);IV型胶原酶、RPIM1640(均