食用菌菌种制备技术.doc

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1、食用菌菌种制备技术菌种：原意是指砲子（相当于植物的种子），但在实际生产中，常将经过人T培养的纯菌丝体连同培养基质一同叫做菌种。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（二级种）三级。母种（一级）：将纯菌丝体或砲了在试管培养基屮繁殖而成。可以繁殖原种，也适宜菌种保藏。原种（二级）：母种菌丝在固体培养基上繁殖而成。这一过程增强菌丝对培养环境的适应性，又起到扩繁的作用。原种可以真接出菇。栽培种（三级）：由原种扩繁而成。主要是为了扩繁，为生产提供足够的菌种。菌种制备：也称种了•制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具

2、有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐屮进一步扩大菌体量及合成产物Z用。种了制备包括孑包子制备和菌丝体制备（见图）。OAmual#M»itS1%土畫于2冷凉干3件丙倉子4子56

3、♦子7其屮（1）〜（4）为抱了•制备过程。保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，无菌操作挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25°C（或较高温度）下培养5〜7天（或较长时间）。所得砲了还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多胞了，对于孫菌类胞了制备，多数采用大米、小米Z类的天然培养基。将培养成熟的斜面抱了制成悬浮液，接种到扁瓶固体培

4、养基上，于25〜28°C培养14天。将成熟的扁瓶抱了于真空屮抽干，使水分降至10%以下，并放入4C冰箱屮备用。一次制得的砲子瓶可在生产上延续使用半年左右。放线菌砲了的培养基人多是采用隸皮或豌豆浸出液、牛肉膏及无机盐与琼脂制成的。将斜曲砲了接入扩大的扁瓶砲了培养基屮，于28〜37°C培养5〜14天。所获得的大量砲子可肓接作为种了罐（6）的种了。如果有些生产菌种不产弛子，如赤每素产生菌或产砲子不多的,则可采用摇瓶（5）液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种了罐的日的是使接入冇限的砲了或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大最菌体。H

5、•中的培养基纽分M是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆等），及无机盐（如磷酸盐）等。作为发酵罐（7）的种了应是生命力吐盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%〜20%O一、母种的制备用试管制成斜面培养基，并接种原始试管种（保留种），并用于生产的母种即为生产母种，可用于扩接原种。1.培养基配方配方一弓铃薯培养基：马铃薯200克、葡萄糖20克、琼脂20克、水1000毫升、PH值自然；配方二综合马铃薯培养基：马铃薯200克、葡萄糖20克、磷酸氢二钾2克、硫酸镁0.5克、维生素BJ0毫克、琼脂20

6、克、水1000亳升、PH值自然；配方三合成培养基：马铃薯20克、匍萄糖20克、磷酸二氢钾2克、蛋白腺10克、牛肉膏5克、酵母膏5克、硫酸镁0.8克、水1000亳升、PH值白然；2.培养基制作方法先将马铃暮洗净去皮切成薄片,称取200克,加水1000毫升,煮沸15-20^钟，用4层纱布过滤，取其滤液并补足水至1000毫升，加入琼脂20克，再加热，琼脂溶化示，再加入其它配方屮的药品。培养基的分装，应在培养凝固前进行（琼脂培养基40°C凝固）一般用漏斗，或分装瓶，下端连接一段软橡皮管，橡皮管下面再连接一小段玻璃管，在橡皮管上安

7、装一个止水弹簧夹,分装时将玻璃管细口插入试管内，应注意不使培养基黏附在试管口上，以免杂菌感染，每支试管装入最为试管长度1/4。装好麻塞上棉塞，每10支试管扎一捆，棉塞上用犁料纸封扎好，用线细捆扎起来。3.灭菌将分装麻的试管扎捆好，放入高斥蒸气灭菌锅，在1.1kg/cm2压力下（锅入温度达121°C）灭菌30分钟，使微生物包括芽抱全部杀死。待压力降到0度时，慢慢放出锅内气体，试管取出后趁热将试管口一端垫高，斜靠在桌上的小木棒上，使管内培养液斜面上长度达2/3—3/5,试管上面覆盖毛巾，冷却后即成斜面固体培养基。4.接种、培

8、养余购冷却示通过无菌操作方法将菌种接入，叠28°C、3天示将温度降至24°C继续培养，7・15天左右，菌丝长满幣个试管斜面，即成（生产）母种。为检验培养基灭菌是否彻底，可在常温下放置48小时，未发现有杂菌产生，即可接种、培养，长满菌丝后即可转管或转接原种。二、原种、制备母种接种到原种培养基上，进行扩大繁殖冇种即为原种，原种一般采用广口瓶或袋装。1•培养基配方配方一木屑裁皮培养基：阔树木78%、联皮20%.糖1%、石膏粉1%、水65%；配方二棉籽売木屑培养基：棉籽壳80%、木屑15%、糖1%、埶皮5%、过磷酸钙3%、石膏粉

9、1%;2.拌料与装袋选用新鲜无霉变原料,根据生产所需的数量，计算配料总量,将秋皮、石膏粉均匀的混合在培养料里，糖和过磷酸钙溶于水后，按上述干料量加入水，比例为1：1.3拌匀，培养料含水量60%为宜，含水量以手紧握培养料指缝间有水欲滴为宜。堆闷30分钟麻，装瓶（袋）。用机械或人工装袋稍加压实，在袋口外套入頼料环，形成彖