临床医学论文-补肾固齿丸对人牙周膜成纤维细胞分泌TGF-β1的影响.doc

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1、临床医学论文•补肾固齿丸对人牙周膜成纤维细胞分泌TGF-B1的影响作者：董伟姜茵吴亚菲张静仪【摘要】H的研究补肾固齿丸水提液对人牙周膜成纤维细胞（PDLCs）TGF-01分泌水平的影响，以及在内毒素存在的条件下其分泌水平的改变。方法原代培养人分周膜成纤维细胞培养液屮加入内毒素和不同浓度的固齿丸水提液，在0、2、4、6天不同时间点用ELISA试剂盒检测培养上清液中的TGF-P1水平。结果最高和较高剂量药物组TGF—01的分泌水平明显高于其它组（PvO.05）,在含有内毒素组屮，最高药物剂量组的TGF-P1水平高于对照组，结果差异具有显着性（Pv

2、O.Ol）。结论补肾固齿丸能在一定程度上改变PDLCs分泌TGF・B1的水平，内毒素存影响药物对PDLC的作用。【关键词】补肾固齿丸TGF-31内毒索ELISA[Abstract1ObjectiveTostudythesecretioneffectleveloftransforminggrowthfactorP1(TGF・01)inducedbyadministrationofextractsfromGuchiwan,atraditionalChinesemedication,onhumanperiodontalfibroblastinvit

3、rowithendotoxin.MethodsCulturedPDLCsfromhumanteethwerestimulatedwithLPSanddifferentconcentrationsGuchiwanextracts・ELISAkitwasusedtodetectTGF-P1levelofdifferenttestgroupsatdifferenttimc.RcsultsAhigherlevelofTGF・3lwasobservedatthetwohighestconcentrationgroupsofGuchiwan(P<0.05

4、).Inaddition,therewasasignificantdifferenceintheTGF・P1levelsbetweenthrhighestconcentrationgroupandtheothermedicationgroupsorthecontaolgroup(PvO.Ol)intheexistenceofLPS.ConclusionThisstudyindicatesthatGuchiwancaninfluencethesecretionlevelofTGF・01fromPDLC,whichmaybelessdistinc

5、tintheexistenceofLPS.［Keywords!bushenguchipi11;TGF・01;cndotoxin;ELISA牙周病是在致病菌和宿主免疫反应失衡的情况下发牛的感染性疾病。多种炎性介质和细胞因子参与了牙周病的发生发展过程。TGF—卩是一种多肽生长因子,TGF-P1是其重要的亚型之一。TGF-P1能调节牙周组织的免疫应答；促进牙周组织的损伤修复，对牙周膜细胞的增殖和牙周软硬组织的再牛起着重要的调节作用，促进牙周膜细胞的增殖及DNA的合成，增加成纤维细胞合成胶原及纤维粘连素，减少基质金属蛋白酶和纤溶酶激活剂的合成和结缔纽

6、织的破坏；TGF-P1还能通过对牙胚细胞的调控影响牙体牙周组织的早期发育。牙周组织周围的TGF—B1可来源于血小板，也可来自于牙周膜成纤维细胞自身［1］。补肾固齿丸是依照屮医牙周病病因“肾虚齿豁”学说指导，根据补肾固齿的原则，在六味地黃丸的基础上增加了骨碎补、青盐、黃芷等药而制成的治疗方剂。经临床研究和动物实验证实该药具有良好的治疗效果，能改善全身及牙周组织状况，增加牙槽骨致密度，减轻牙周组织炎症和破坏［2］。但迄今为止同齿丸治疗牙周病的确切机制尚不十分清楚，已有学者曾经从细菌学组织学酶组织化学等不同角度对其治疗机制进行研究，发现固齿丸能增强

7、健康菌丛的稳定性，维护正常炎细胞功能等多种作用［3〜5］。本研究采用体外细胞培养的方法观测补肾固齿丸水提液对人牙周膜成纤维细胞分泌TGF-P1的影响，探讨补肾固齿丸的作用机制，以期为更好地利用天然药物治疗牙周病提供理论依据。1材料与方法1.1主要药品与试剂高糖DMED培养基（Gibco,美国）；类标准胎牛血清（兰州民海生物）；胰酶（Gibco美国）；二甲基亚砚（上海药品制剂公司）；青霉素100u/ml；链霉素100u/ml：TGF~P1双抗夹心ELISA试剂盒（RB分装）；内毒素E.coli,055:B5（Sigma,德国）;补肾固齿丸水提液

8、（九芝堂金鼎药业有限公司）1.2仪器相差倒置显微镜（Olympus,日本）；C02恒温孵箱（Forma,美国）;4°C低温离心机（Jouqt,美国）；细胞计数仪（B