VEGFA及其可溶性受体sFlt-1表达在非小细胞肺癌中的临床意义.doc

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1、VEGFA及其可溶性受体sFlt-1表达在非小细胞肺癌中的临床意义袁娅娟(第四军医大学西京医院检验科陕西西安710032)【摘要】目的研究VEGFA及其可溶性受体sFlt・l表达在非小细胞肺癌中的临床意义。方法选择2008年3月・20□年3月在我院行肺切除手术的150患者，根据术后病理检查结果分为观察组109名非小细胞肺癌患者和对照组41名肺部良性病变患者。釆用realtime-PCR的方法分别检测肺部病变组织VEGFA,sFlt・l在mRNA水平的变化情况，用ELISA检测肺癌患者外周血中VEGFA、sFlt・l蛋白水平的变化情况。结果观察组

2、患者肺部组织及外周血中VEGFA水平明显高于对照组,sFlt-1水平明显低于对照组(P<0.01)o观察组中HI期和IV期肿瘤组织VEGFA含量明显高于，sFlt-1明显低于I期和II期肿瘤组织；中低分化的肿瘤组织中VEGFAmRNA含量明显高于，sFlt-1明显低于高分化的肿瘤组织。结论VEGFA和sFlt-1的表达量的改变与肺癌的发生以及肺癌的分期均有密切的关系，检测该指标对于肺癌的早期诊断具有积极意义。【关键词】VEGFAsFlt-1非小细胞肺癌PCR,ELISA【中图分类号1R730【文献标识码】A【文章编号］2095-1752(201

3、2)24-0049-02肿瘤组织的生长、侵袭和转移的过程依赖肿瘤血管的生成，许多相关的血管生长因子及其受体参与的信号通路在该过程中发挥重要作用。目前肺癌的诊断主要依靠支气管镜以及影像学检查，难以早期发现肺部病变。为了研究血管生长因子VEGFA其可溶性受体sFlt-1在非小细胞肺癌中的表达并探讨其在非小细胞肺癌早期诊断中的作用，我们采用了realtime-PCR及Elisa的方法分别检测肺部病变组织及肺癌患者外周血中VEGFA、sFlt-1在mRNA和蛋白水平的变化情况。1、资料与方法1.1研究对象选择2008年3月-2011年3月期间在我院行肺

4、切除手术的150名患者，根据术后病理诊断结果，将150名患者分为观察组109名非小细胞肺癌患者和对照组41名肺部良性病变患者。取得患者家属同意并签订知情同意书后，收集患者手术切除的肺部组织、于液氮中保存。1.2试剂和仪器Trizol及反转录试剂盒购买于invitrogen公司，荧光定量PCR和ELISA试剂盒购买于Takara公司、引物于上海生工公司合成。引物序列：β-actin：上游5’-TGTGTTGGCGTACAGGICTTTG-3’,下游5’-GGGAAATCGTGCGTGACATTAAG-

5、3’。VEGFA：上游5'-GCCCGCTGCTGTCTAATG-3*,下游5*-TTTACACGTCTCGGATCTTG-31；sFlt-1：上游：5'・AAGATGGGTTACCTGCGACTG・3‘，下游：5*-CCGGGTCTGGAAACGATGA-3'o1.3方法采用Trizol法抽提肺部组织中的总mRNA、并反转录合成cDNA第一链。PCR扩增采用荧光定量PCR试剂盒,扩增条件：95°C、15s,60°C、30s,72°C、30s,40个循环。分别扩增同一样本的目的基因和看家基因，利用其ΔCt值进行相对定量。

6、即用同组中每个样木目的基因的Ct值减去的β-actin的Ct值依Delta;Ct),再用处理组的ΔCt减去对照组的△ct(ΔΔCt),代入公式2—ΔΔCt计算即得到处理组相对对照组PCR产物的浓度比值，以此来反映VEGFA和sFIt-lmRNA表达量的变化。采用购于ELISA试剂盒检测患者外周血中VEGFA和sFlt-1的含量，以此反应目的基因蛋白水平的变化。1.4统计学方法采用SPSS18.0对所得数据进行t检验，以P<0.05判断为具有统计学意义。2、结果2.1两组患者肿

7、瘤组织内及外周血中VEGFA和sFlt-1水平的比较(见表1)观察组患者外周血和肺组织中VEGFA含量明显高于对照组，sFIt含量明显低于对照组。通过SPSS18.0进行t检验可知所有差异均有统计学意义(P<0.01)o表肿瘤组织内及外周血中VEGFA和sFlt・l水平2.2不同分化程度和不同分期的肿瘤组织中VEGFA和sFIt-lmRNA水平的比较(见表2)观察组肺组织中，肿瘤分期越差、分化程度越低，VEGFA含量越高、sFlt・l含量越低。通过SPSS18.0软件进行t检验可知所有差异均具有统计学意义(P<0.01)o表2：肿瘤组织中VEG

8、FA和sFIt-lmRNA水平3、讨论浸润性牛长和远处转移是恶性肿瘤重要的牛物学标志。浸润和转移的过程需要依赖新牛血管和淋巴管的形成［1］。在诸多促进