微生物实验酵母菌的计数形态观察.doc

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1、微生物学实验开课时间：2015年3月20日实验名称：功能微生物的形态观察（三）酵母菌的形态观察、大小测定和直接计数1•实验记录（包括实验现象和原始记录）1）观察酵母菌形态。%1取一干净的载玻片，滴一滴蒸憾水，轻轻挑取老师准备好的酵母菌适量，蘸于蒸镭水上制成水玻片，盖上盖玻片，直接在显微镜下观察%1先在10倍镜下找到酵母菌，然后40倍镜拍照下图为酵母菌的形态（放大倍数:15X40）2）酵母菌的大小测定①将盒子里的镜台测微尺置于载物台上，注意刻度朝上，分别在4、10、40倍下数出它与目镜测微尺的重合格数，完成目镜测微尺的校正冃镜测微尺镜台测微尺4倍12510倍10504

2、0倍2050②记录观察到的酵母菌大小，主要数酵母菌的长与宽所占的格数，注意尽量找大小不同，范围较大的酵母菌10个宽长13.13.323.33.833.84.743.12.952.21.962.82.273.33.183.63.393.73.1102.11.9%1酵母菌的数量计数取清洁无油的血细胞计数板，盖上盖玻片，将酵母菌液摇匀，在盖玻片边缘滴儿小滴，注意让菌液自行渗入计数室内，静置5min,在40倍镜下计数，选取9宫格中央的小室，计数如下（只数上边和左边的酵母菌）135121134130123A室129117121123131注：上面的图片均摄于2015年4月10

3、Ho2.结果与分析1）酵母菌在显微镜下要比细菌大得多，不具有鞭毛，明显有细胞核，在显微镜下形成一个明亮的光圈2）校正目镜测微尺后，根据公式：目镜测微尺每格长度（um）二两重和线间镜台测微尺格数*10/两重合线间冃镜测微尺格数，计算出每格长度分别是4倍（25）、10倍（10）、40倍（2.5）,即酵母菌大小计算每格为2.5um编号宽长17.88.328.39.539.511.847.37.854.87.865.57.077.88.388.39.097.89.3104.85.3平均7.28.4因此菌体大小范围为(4.8—9.5)X(5.3-11.8)um3）酵母菌的计数

4、结果如下图12345AB两室平均菌数/ml第一室135121130123134643256327.9X第二室129117123131121621251082.结论1）酵母菌的形态特征：对比细菌，酵母菌要大得多，并且酵母菌细胞核而细菌只有拟核，有些细菌还有鞭毛而酵母菌没有，呈椭圆状2）酵母菌的大小:酵母菌的大小经实验得出，大概范围为（4.8—9.5）X（5.3-11.8）um3）酵母菌数量：木实验中酵母菌的数量大致为7.9X10-个/ml3.思考题1）当接目镜不变，目镜测微尺也不变，只改变接物镜，目镜测微尺每格所量的镜台上物体的实际长度是否相同？为什么？答：不同，物镜

5、成实像于冃镜前方，标尺即位于物镜所成实像的位置（在对好焦后），冃镜成虚像于明视距离，所以物镜倍数增大以后，原来占一个单位长度的实像现在会占不同的单位，即测微尺每格所代表的长度不同2）结合你的实验体会，总结哪些因素会造成血细胞计数板的计数误差，应如避免？答：1•活细胞和死细胞不易分开，数出来的是活死细胞的总和2•细胞溶液必须均匀，再用之前要震荡均匀，否则细胞沉在试管底部，容易出现误差应该避免操作误差，实验时每次使用细胞溶液都要震荡均匀2.认识与体会1）熟练操作显微镜，并可以在观察时计数2）掌握了血细胞计数法的使用3）了解了酵母菌一般的大小和形态特征