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1、常见实验用溶液的配制方法默认分类2008-07-0414:10:54阅读4评论0字号：大中小一、常用溶液lmol/L亚精胺(Spermidine)：溶解2.55g亚精胺于足量的水屮，使终体积为10mL分装成小份，贮存于-20°Colmol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水屮，使终体积为10ml。分装成小份，贮存于-20°Co10mol/L乙酸胺(ammoniumacetate):将77.1g乙酸胺溶解于水屮，加水定容至1L后，用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。10mg/ml牛血清蛋口(BSA)：加lOOmg的牛血清蛋口(组分V或分子生物学试剂级，无DNA
2、酶)于9.5ml水屮(为减少变性，须将蛋白加入水屮，而不是将水加入蛋白)，盖好盖后，轻轻摇动，直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份，贮存于-20°Co1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶屮加32.4ml水，分成小份贮存J'-20°Co或转移lOOmg的二硫苏糖醇至微量离心管，加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。8mol/L乙酸钾(potassiumacetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水屮，加水定容至ljlOOmlo1mol/L氯化钾(KC1):溶解7.46g氯化钾于足量的水屮，加水定容到10
3、0ml。3mol/L乙酸钠(sodiumacetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水屮，用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到lOOmlo0.5mol/LEDTA：配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA-2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。1mol/LIIEPES：将23.8gHEPES溶于约90ml的水屮,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100mlo1mol/LHC1：加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水屮。25mg/mlIPGT：溶解2
4、50mg的IPGT(异丙基硫代半乳糖昔)于10ml水中,分成小份贮存于-20°Colmol/LMgC12：溶解20.3gMgC12-6H2OJ-足量的水屮,定容到lOOmLlOOmmol/LPMSF：溶解174mg的PMSF（苯甲基磺酰氟）于足量的异丙醇中,定容到10ml。分成小份并用铝箔将装液管包裹或贮存于-20°Co20mg/ml蛋白酶K（proteinaseK）:将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份，贮存于・20°C。10mg/mlRnasc（无DNase）（DNase—freeRNa
5、se）:溶解lOmg的胰蛋口RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液屮（pH5.0）。溶解后于水浴屮煮沸使DNA酶失活。用lmol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于・20°C贮存。（配制过程屮要戴手套）5mol/L氯化钠（NaCl）:溶解29.2g氯化钠于足量的水屮，定容至100ml。10N氢氧化钠（NaOH）:溶解400g氢氧化钠颗粒于约0.9L水的烧杯屮（磁力搅拌器搅拌），氢氧化钠完全溶解后用水定容至lLo10%SDS（十二烷基硫酸钠）：称取1OOgSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯屮，用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。2mol/L111梨（糖
6、）醇（Sorbitol）:溶解36.4gll
7、梨（糖）醇于足量水中使终体积为lOOmlo100%三氯乙酸（TCA）:在装有500gTCA的试剂瓶中加入100ml水,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。（稀释液应在临用前配制）2.5%X—gal（5■渙・4・氯・3■眄際一卩.半乳糖if）:溶解25mg的X—gal于lml的二甲基甲酰胺（DMF）,用铝箔包裹装液管，贮存于-20°ColOOxDenhardt试剂(Denhardt'sregent)成分及终浓度配制100ml溶液各成分的用量2%聚蔗糖（Ficoll,400型）2%聚乙烯毗咯烷酮（PVP-40）2%BSA（组分V）水2g2g2
8、g加水至总体积为100ml依照上表称取各组分，溶于水屮定容。过滤除菌及朵质，分装成小份，贮存丁J0°Co10x标准DNA连接酶缓冲液（standardDNAligasebuffer）（粘端、平端连接）成分及终浓度配制10ml溶液各成分的用ft
9、0.5mol/LTris-HCl100mmol/L5mllmol/L贮液lmlMgC12100mmol/LDTT2mmol/LATP5mmol/L盐酸亚精胺（可选）0.5mg/mlBSA（组分V）（可选）水lmol/L贮液1ml1mol/L贮液200u
