基于超高效合相色谱对黄芪中5种主要黄酮类化合物的快速检测.pdf

《基于超高效合相色谱对黄芪中5种主要黄酮类化合物的快速检测.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第44卷分析化学(FENXIHUAXUE)研究报告第5期2016年5月ChineseJournalofAnalyticalChemistry731～739DOI：10．11895／j．issn．0253-3820．150788基于超高效合相色谱对黄芪中5种主要黄酮类化合物的快速检测王波周围刘小花柳小亚陈亚丽封士兰(兰州大学药学院，兰州730000)(甘肃出入境检验检疫局综合技术中心，兰州730000)摘要建立了利用超高效合相色谱法(Ultraperformanceconvergencechromatography，UPC)快速分离和测定黄芪中5种主要黄酮

2、类化合物(毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷、芒柄花素)的方法。黄芪样品采用80％乙醇提取后，以超临界CO-0．2％HPO一甲醇溶液为流动相，梯度洗脱，色谱柱为WatersACQUITYUPCCSH柱(100Inn×3．0mm，1．8m)，柱温为40℃，流速为0．4mL／min，进样量为1L，检测波长为280nm。整个分析过程仅需15min，分析速度是传统液相色谱的3倍以上。结果表明：毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的检出限及定量限范围分别在0．3～0．5mS／kg和1．0—2．0ms／kg之间，5种黄酮类成分的加标平

3、均回收率均高于99．7％，相对标准偏差(RSD)小于2．2％(n=6)；在最优条件下，对13批不同产地的黄芪进行检测，毛蕊异黄酮、毛蕊异黄酮苷、美的紫檀素、芒柄花苷与芒柄花素的含量范围分别在4．8～102ms／kg、14～277ms／kg、0～135mg／kg、5．3～119ms／kg及2．8～41mg／kg之间；本方法简便快速，重复性良好，结果准确可靠，可用于黄芪药材中5种主要黄酮类成分的含量测定。关键词超高效合相色谱；黄酮类；黄芪引言超高效合相色谱法(Ultraperformanceconvergencechromatography，UPC)是超高效

4、液相色谱(UPLC)和超临界流体色谱(Supercriticalfluidchromatography，SFC)技术的结合，它以超临界流体二氧化碳为流动相主体，依靠流动相的溶剂化能力进行分离与分析J。相对于传统超临界流体色谱重复性较差的缺点，UPC能够通过精确调节流动相强度、压力和温度，在整个分离过程中获得较好的重现性；此外，由于CO超临界流体具有较高的线速度及较低的密度，在分离过程中具有很高的柱效，且分析速度快，灵敏度高，有机溶剂使用量少。此外，CO，可与多数极性和非极性有机溶剂混溶，与气相色谱(Gaschromatography，GC)相比，超临界流

5、体具有类似于液体的密度，为常压气体的200—500倍，具有较高的溶解能力，适于分离难挥发和热不稳定性物质，而气相色谱需将样品气化后才能进行分离操作，不适合于难挥发及热不稳定物质的分离；与液相色谱(Liquidchromatography，LC)相比，超临界流体具有较小的粘度，可减小过程阻力，在相同条件下，压力降比液相色谱的低，并且具有较高的扩散系数和传质速率，在分离操作时所用的时间短，单位时间内分离效能高~51。黄芪为常用补气药，《中华人民共和国药典)2010年版一部载黄芪为豆料植物膜荚黄芪(Astragalusmembranaceus(Fisch)．B

6、ge)或蒙古黄芪(A．membranaceus(Fisch)Bgevar．mongholicus(Bge)Hsiao)的干燥根，其味甘，性温，归肺、脾经；具有补气固表、敛疮生肌等作用，临床用于气虚乏力，表虚自汗，气虚水肿，慢性肾炎蛋白尿和糖尿病等症J。研究表明，黄酮类成分作为其有效成分之一，有抗菌抗病毒、降血脂、抗氧自由基等作用，还具有抗缺血和改善血象作用J。近年对黄酮类成分含量测定方面的报道较多，常见的为高效液相色谱法J，薄层色谱法¨nJ，液相色谱串联质谱法¨¨等，对于液相色谱一质谱法，因为仪器的价格昂贵，在国内还未被普遍使用；层析色谱及高效液相色谱法

7、特异性不强，干扰物质较多、定量不准确，分析时间长，不能用于多种物质的同时测定。本研究采用超高效合相色谱法同时测定黄芪中5种主要黄酮类化合物，在15min内实现了2015—10-10收稿；2015．12-09接受本文系国家”十二五”科技支撑计划课题项目(No．2011BA105B02)资助{E—mail：fengshl@lzu．edu．ca732分析化学第44卷5种黄酮类化合物的分离。实验表明，本方法快速准确、灵敏度高、重复性好、实用性强，为黄芪中5种主要黄酮类化合物的定性与定量检测提供了一种高效可行的色谱检测方法。2实验部分2．1仪器、试剂与材料超高效合

8、相色谱仪(美国Waters公司)，配有WatersEmpower3数据处理系统；