微生物学实验思考讨论错题整理.doc

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1、微生物学思考讨论错题整理实验一显微镜的使用和细菌基本形态观察1.观察标本时，必须依次用低倍镜、高倍镜，原因是低倍镜视野比较大，能看到的范围大，容易找到观察的目标，然后再用放大倍数高的高倍镜或油镜有目的的观察。2.影响显微镜分辨率的因素有哪些？实验二环境微生物的检测1.本实验只取了台面的小部分样品，经培养后观察到4种不同的菌落，且各菌落皆有自己鲜明的特点。菌落的数量反映了A种细菌在台面的存活能力最强，故种群数量大，相对于B,C,D细菌在实验台台面有竞争优势。由于台面是平面，空气是立体的，故空气中的细菌比台面的多，而且空气中的微生物与暴露时间有关。由此可见，一个清洁的实验台有利

2、于实验的成功（不被污染）。2.通过本实验，在防止微生物污染和扩散方面，我体会到我们生活在微生物的包围之中，微生物无处不在，故十分容易对培养基造成污染，因此实验过程要求无菌操作，整个微生物操作过程均应在酒精灯旁或在洁净台内进行，以避免污染微生物。实验过后，所有带活体微生物的器皿和材料均应灭菌，防止微生物扩散，污染环境。实验三细菌简单染色及革兰氏染色1.革兰氏染色成败的关键因素是脱色，脱色不够造成假阳性，脱色过度造成假阴性。其他影响因素：1）菌龄：选用对数生长期为宜，若太老，由于菌体死亡或自溶使革兰氏阳性细菌转呈阴性反应。2）涂片厚薄均匀度：太厚会使脱色不完全造成假阳性。3）媒

3、染时间、脱色时间及脱色时的酒精浓度（95%乙醇，不应被稀释）2.制片时通过加热固定使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上，且不破坏细胞形态。但要注意避免高温所导致的菌体变形。实验五微生物的血球计数板直接计数及细胞大小的测定1.血球计数板直接计数法的原理+该法的有效测量浓度范围是10*6以上+用该法进行计数的适宜浓度是10*7个/ml左右实验六（一）培养基的配制及灭菌1.湿热灭菌法的优点+缺点：1）设备费用高2）不能用于对热不稳定的物料灭菌2.请设计干热灭菌和湿热灭菌效果比较的方案（二）微生物的分离纯化与菌落计数1.平板菌落计数法+因为+，所以计数结果往往偏低，故使用CFU（注意

4、用科学计数法表示数量）表示样品活菌含量。该法的结果受培养条件的影响，故需标示培养条件。该法可以通过培养条件，而可以实现样品中不同种类微生物的分别测量。2.结论：菌落+，形态是否单一；个体形态+，是否均一。最终是否得到了纯培养。3.划线时要快速，使接种环在平板上平稳滑动。4.土壤样品应充分振摇！5.当平板上长出的菌落不是均匀分散的，而是集中在一起，你认为问题出在哪里？答：因为倒平板后未立即摇匀。6.血球板直接计数法：1）优点：直观，快速，操作简单2）缺点：仅适用于菌液浓度高于10*8个/ml的样品，菌浓度低时计数不准确或无法计数。该法不适用于丝状微生物的计数，但可计数它们的孢

5、子。平板菌落计数法：1）优点：可通过不同的培养条件对样品中的微生物进行分类分别测量，方法应用范围广泛，几乎可以测量任何样品。2）缺点:操作繁琐耗时（三）微生物的生理生化特征1.细菌菌株（编号）：来源：XX由XX样品，经XX培养基XX及XX分离得到的单菌落。经镜检，证实为纯培养的细菌。（四）目标微生物的筛选1.实验中，若两个产抗生素的对照组：细黄链霉菌和青霉均未得到产抗生素阳性的结果，说明“抗生素产生情况”的实验是失败的。得出的“放线菌XX号不产青霉素“的结论也就不可靠。应予以讨论。实验七噬菌体效价的测定1.观察比较平板上的噬菌斑的生长情况：对照平板上无噬菌斑出现，但形成了铺

6、满整个平板之菌苔。+2.实验中影响噬菌斑大小的因素有：1）上层琼脂的浓度对噬菌斑能否正常形成有主要影响2）下层琼脂的营养必须适宜于宿主的生长3）噬菌体为烈性噬菌体数与宿主细胞浓度比例越高，菌斑越大4）外在因素：培养时间，温度，培养基类型会影响细菌和噬菌体的生长情况和噬菌体对细菌的侵染程度，从而影响噬菌斑大小。5）与宿主细胞的特异性越低，形成噬菌斑的机会越大。3.保温过程中剧烈摇晃试管可能会使噬菌体难以在宿主上吸附。