提高生物指示剂菌片指示菌回收率的方法研究.pdf

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1、ChineseJournalofDisinfection2014；31(4)【论著】提高生物指示剂菌片指示菌回收率的方法研究朱以萍，谢清，黄力勤，张瑞丰，陆兵，吕京(中国科学院微生物研究所，北京100101；1军事医学科学院生物工程研究所；2中国合格评定国家认可中心)摘要目的研究生物指示剂菌片指示菌回收方法，以提高指示菌回收效率。方法采用菌片破碎法，再以常规活菌培养计数方法对指示菌进行培养计数。结果采用菌片破碎法可使进口生物指示剂菌片指示菌平均回收率达83．2％，使国产生物指示剂菌片指示菌平均回收率达70．2％；相比之下，用传统的振荡法指

2、示菌的平均回收率均≤1．0％。结论采用菌片破碎法，生物指示剂菌片指示菌回收效率明显优于传统的振荡法。关键词生物指示剂；菌片；破碎法；振荡法；回收率中图分类号：R181．2文献标识码：A文章编号：1001—7658(2014)04—0346—03RESEARCHoNTHEMETHoDFoRIMPRoVINGTHESPoRERECoVERYRATEoFBIo—INDICAToRSTRIPSZHUYi-ping，XIEQing，HuangLi—qin，ZHANGRui一ng，LUBing，LVJing(InstituteofMicrobiolo

3、gy，ChineseAcademyofSciences，Beijing100101；1AcademyofMilitaryMedicalScience，BeijingInstituteofBioteehnology；2ChinaNationalAccreditationServiceforConformityAssessment，China)Abstract0bjecfiveTodevelopasporeextractingmethodforefficientlyimprovingthesporerecoveryratewhendoings

4、poreenumerationofbio—indicatorstrips．MethodsTheBIstripssmashmethodWasusedtoextractsporesfromthestripsbeforeperformingsporeenumeration．ResultsWiththismethod．themeanrecoveryratewas83．2％forSGMBIstripsand70．2％forSihuanBIstrips．whileitwas≤1．0％forSGMBIstripsbyvo~exmethod．Conclu

5、sionTheestab—lishedstripsmashmethodismuchmoreeficientthantheconventionalvo~exmethod．Keywordsbio—indicator；strips；stripsmashmethod；vortexmethod；sporesrecoveryrate利用生物指示剂(bio—indicator，BI)验证消毒78％[2_引。本研究利用组织破碎仪将菌片彻底破与灭菌效果的方法常用于Et常消毒与灭菌效果监测碎(简称菌片破碎法)，可明显提高菌片上指示菌的和评价。在评价试验操作中

6、，要求菌片上的指示菌回收率。现将完整的操作方法和研究结果报告如回收率达到50％以上¨J。采用2002年版《消毒技下。术规范》所推荐的涡旋震荡法或手掌震敲法，菌片1材料与方法上指示菌的回收率远远达不到规范的要求，无法准确评价消毒灭菌效果。影响菌片指示菌回收效率的1．1试剂材料主要因素是洗脱方法，目前报道较为有效的方法是所用的生物指示剂为美国SGMBiotechInc．公采用超声波破碎处理5～10min，然后再涡旋震荡司生产的二氧化氯气体灭菌专用生物指示剂，指示2～5min，指示菌的回收率能达到26％～菌为枯草芽孢杆菌黑色变种(ATCC937

7、2)，载菌量为1．6×10cfu／片，以及北京四环卫生药械厂有限公司生产的四环牌生物指示剂，指示菌为军事医学[基金项目]“十二五”国家科技支撑计划(2011BAI15B03)；卫科学院消毒检测中心保存菌种，亦为枯草芽孢杆菌生公益性行业科研专项(201302006)。黑色变种(ATCC9372)，载菌量为5×10～5×10。[作者简介]朱以萍(1963一)，女，武汉人，博士，高级工程师，现主要从事实验室生物安全管理与研究。cfu／片。两种生物指示剂均在有效期内。[通信作者]吕京，Email：Ivj@cnas．org．cn菌片处理采用德国QI

8、AGEN公司组织破碎仪中国消毒学杂志2014年第31卷第4期·347·和德国GENIUS涡旋震荡器；洗脱液为10g／L硫代响，结果表明：菌片破碎法的平均回收率为84．1％；硫酸钠、1．0g／L