重组人纽兰格林药效学和毒理学研究.doc

《重组人纽兰格林药效学和毒理学研究.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、重组人生长因子药效学和毒理学研究1.试验目的：评价重组人生长因子对快速起博所致Beagles犬充血性心力衰竭的药效作用，同时评价药物安全性，为临床用药安全提供依据2.受试药物：重组人纽兰格林，规格：250ug/瓶3.试验动物：Beagles犬，40只（雄），体重8～10kg4.快速起博所致Beagles犬充血性心力衰竭模型建立方法：犬安装起博器快速起博3周，选择EF值低于40%的模型动物进行实验5.试验分组：随机分5组，6只/组（雄）6.给药方法：每天静脉滴注10小时7.剂量设置：假手术组：等容量的赋形剂；模型对照组：等容量的赋形剂低剂量组：1.0u

2、g/kg;中剂量组：3.0ug/kg;高剂量组：9.0ug/kg8.给药期限：连续10天，每天给药一次，每次给药10小时9.药效学观测指标：9.1心功能检测：起博前（即检疫期第25天）、起博后3周和给药10天后各在犬清醒状态下检测1次主要指标有9项：室间隔厚度IVS、左室后壁厚度PW、左室舒张末容积LVDd、左室收缩末容积LVDs、心室射血分数EF、缩短分数Fs、心输出量CO、左室舒张末期内径LVEDD、左室收缩末期内径LVEDS9.2血流动力学检测：给药10天后检测1次主要指标有6项：心率HR、左心室收缩压LVSP、左心室舒张末期压LVEDP、心室

3、压力上升速率+dp/dt、心室压力下降速率-dp/dt、平均动脉压MAP9.3心肌耗氧量检测9.4心脏大体解剖：指标有4项：全心重、左心重、右心重、左室后壁厚度10.毒理学研究10.1检疫期4周10.2给药期限：连续给药10天，每天静脉滴注10小时10.3无恢复期10.4观察指标和测定指标1）生命体征：每天上午和下午各观察1次，如有动物死亡，记录死亡时间2）一般症状：每天上午和下午各观察1次，包括外观、体征、行为活动等3）摄食量：每天记录1次4）体重：每周称量1次5）肛温：每周测量1次6）各导联心电图，血压和心率检查：检疫期第18天，第25天和起博后

4、3周各测1次，之后的10天给药期间每天测2次（给药前和当天给药结束时各测1次）7）心脏B超检查：检疫期第25天和起博后3周各测1次，第10天给药结束后24小时测1次指标有12项：心包积液、室间隔厚度IVS、左室后壁厚度PW、左室舒张末容积LVDd、左室收缩末容积LVDs、射血分数EF、缩短分数Fs、二尖瓣血流峰值MV、主动脉瓣血流峰值AV、心率HR、心输出量CO、左室舒张末期内径LVEDD8）血液学指标：检疫期测第18天，第25天和起博后3周各测1次，第10天给药结束后24小时测1次。指标有14项：红细胞数、网织红细胞数、血红蛋白、白细胞总数与分类（

5、包括中性、嗜酸、淋巴、单核）、血小板数、红细胞压积、红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白、红细胞平均血红蛋白浓度，凝血时间9）血清生化指标：检疫期第18天，第25天和起博后3周各测1次，第10天给药结束后24小时测1次。指标有22项：N-末端原脑钠肽（NT-proBNP）（公司自行安排检测）、心肌肌钙蛋白（c-TnI）、心肌酶谱包括4项（肌酸激酶CK，乳酸脱氢酶LDH，肌酸激酶同工酶CK-MB，α-羟丁酸脱氢酶HBDH）、天冬氨酸转氨酶、丙氨酸转氨酶、碱性磷酸酶、尿素氮、总蛋白、白蛋白、葡萄糖、血清总胆红素、肌酐、总胆固醇、钠、钾、氯、钙、镁、磷10）

6、尿常规指标：检疫期第18天，第25天和起博后3周各测1次，第14天给药结束后24小时测1次。指标有9项：白细胞、亚硝酸盐、酸碱度、尿蛋白、尿糖、酮体、尿胆原、尿胆红素、血红蛋白11）粪便检查：检疫期第18天，第25天和起博后3周各测1次粪便虫卵、隐血，第10天给药结束后24小时检测粪隐血1次12）眼底检查：于解剖前将动物麻醉用检眼镜检查眼底13）系统解剖：第10天给药结束后24小时处死全部动物，进行尸解（采用10%氯化钾处死，使动物心脏停搏于舒张期，取材进行电镜检查）14）脏器系数：解剖时取心、脑、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、淋巴结、甲状腺、睾丸、

7、前列腺称重并计算各自的脏器系数15）病理组织学检查：取心（病理组织学检查时着重观察心肌组织、传导纤维，测量左室后壁厚度）、脑、肝、脾、肺、脑、胃、十二指肠、回肠、结肠、肾、膀胱、肾上腺、垂体、甲状腺、胸腺、胰、睾丸、前列腺、淋巴结（颈、肠系膜）、注射局部的血管、皮下组织、视神经（病理组织学检查时着重观察肝、胰、视神经）16）电镜检查：窦房结、浦肯野纤维、左心室、左心房17）骨髓检查：解剖前，从股骨采取骨髓，光镜下镜检巨系、粒系、红系、淋巴、浆细胞及其他类型细胞