物体表面微生物监测标准操作规程.doc

物体表面微生物监测标准操作规程.doc

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1、物体表面微生物监测标准操作规程1.目的规范物体表面采样及监测标准操作规程。2.适用范围2.1医院感染高风险部门,每季度进行检测。2.2发生有暴发流行。3.采样时间潜在污染区、污染区消毒后采样,清洁区根据现场情况确定。4.职责医院感染管理专职人员或兼职人员应遵守本程序。5.采样面积被采表面<100cm2,取全部表面;被采表面≥100cm2,取100cm2。6.采样方法用5cm×5cm灭菌规格板放在被检物体表面,用浸有无菌0.03mol/L磷酸盐缓冲液(PBS)或生理盐水采样液的棉拭子1支,在规格板内横竖往返各涂抹5次,并随之转动棉拭

2、子,连续采样1~4个规格板面积,剪去手接触部分,将棉拭子放入装有10ml采样液的试管中送检。门把手等小型物体则采用棉拭子直接涂抹物体采样。若采样物体表面有消毒剂残留时,采样液应含相应中和剂。见表(5.5)。表5.5化学消毒剂的常用中和剂消毒剂相应中和剂浓度(%)含氯消毒剂硫代硫酸钠0.2~1.0复合含氯消毒剂硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂0.2~1.0+2.0+0.3过氧乙酸硫代硫酸钠0.1~0.5过氧化氢硫代硫酸钠+吐温80+卵磷脂0.5~1.0+2.0+0.3碘酊碘伏硫代硫酸钠+吐温800.5+2.0甲醛双甲酮+马林1.0+0.

3、6戊二醛甘氨酸+吐温802.0+2.0乙醇吐温80+卵磷脂3.0+0.3氯已定吐温80+卵磷脂苯扎溴铵吐温80+卵磷脂注:配制各种中和剂均使用磷酸盐缓冲液(PBS)为基础溶剂。7.检测方法将采样管充分振荡后,取不同稀释倍数的洗脱液1.0ml接种平皿,将冷至40℃~45℃的熔化营养琼脂每皿倾注15ml~20ml;36℃±1℃恒温箱培养48h,计数菌落数,必要时分离致病性微生物。8.结果计算:8.1规则物体表面物体表面菌落总数计算方法见式(A.2):物体表面菌落总数(CFU/cm2)=平均每皿菌落数×洗脱液稀释倍数.........(

4、A.2)采样面积(cm2)8.2小型物体表面的结果计算,用cfu/件表示。9.结果判定9.1I、II类环境:物体表面细菌菌落总数≤5cfu/cm2。9.2III、IV类环境:物体表面细菌菌落总数≤10cfu/cm2。参考文献GB15982-2012医院消毒卫生标准

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