九、HPLC 的性能检查和色谱参数测定.pdf

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1、HPLC的性能检查和色谱参数测定一、实验目的1.熟悉高效液相色谱仪性能检查和色谱参数测定的方法。2.了解高效液相色谱仪的一般使用方法。二、实验原理（略）三、仪器和试剂（略）四、实验步骤1．观察流动相流路，检查流动相是否够用，检查连接管路；2．基线稳定性的测定：在检测器灵敏度放在较高档观察记录基线1h，测定噪音和漂移，色谱条件：ODS柱；流动相：甲醇－水（80：20）；流速：0.8ml/min；检测器：UV254nm；3．检测限和重复性的测定（色谱条件同上）：试样为苯－萘－苯磺酸钠的乙醇溶液；仪器基线稳定后进样20ul，记录色

2、谱图及相关谱图信息，测定死时间、保留时间、峰高、半峰宽、峰面积等；4．重复进样5次，以萘计算检测限，以保留时间和峰面积分别计算仪器的定性、定量重复性。五、数据处理及结果1、计算通式：2、数据处理三线表：HPLC性能测定结果表（可自行设计，也可参见实验指导书）六、讨论七、思考题：2、3题。