铜绿假单胞菌产鼠李糖脂的能力及其对烃类污染物降解的研究.pdf

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1、分类号：Ｑ９３学校代码：１０６９７密级：公开学号：２０１３２０８２９馨々如＾■＼硕±亨恆巧交ＭＡＳＴＥＲ＇ＳＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ．？—铜绿假单胞菌产鼠李糖脂的能力及其对炫类污染物降解的研究？Ｖ．／＇一山．．、＇乂§学科違称：微生物学‘ｋ作者：罗娜指导老师：马艳玲副教授护．－：西北大学学位评定委员会二〇—六年＊？ＶＳＵｉｄｙｏｎ化ｅＡｂｉｌｉｔｏｆＲｈａｍｎｏｌｉｉｄｙｐＰｒｏｄｕｃｔｉ

2、ｏｎａｎｄＨｄｒｏｃａｒｂｏｎＰｏｌｌｕｔａｎｔｓｙＢｉｏｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎｂｙＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓＡｅｒｕｇｉｎｏｓａＡｔｉｉｅｓｉｓｓｕｂｍｉｔｔｅｄｔｏＮｏｒｔｈｗｅｓｔＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｉｎａｒｔｉａｌｆｌｉｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅｒｅｕｉｒｅｍｅｎｔｓｐｑｆｏｒｔ：ｈｃｄｅｇｒｅｅｏｆＭａｓｔｅｒｉｎＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｉｎｇｙＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙＢｙＬｕｏＮａＳｕｐｅｒｖｉｓｏｒＭａＹａｎｌｉｎｇ

3、ＡｓｓｏｃｉａｔｅＰｒｏ传ｓｓｏｒＪｕｎｅ２０１６西北大学学位论文巧识产枚声明书本人完全了解西北大学关于收集、保存、使用学位论文的规定。学校有权保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版。本人允许论文被查阅和借阅。本人授权西北大学可１＾将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。同时授权中国科学技术信息研究所等机构将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》或其它相关数据库。保密论文待解密后

4、适用本声明。＇々学位论文作者签名：罗指导教师签名：特碱娜＿从年／月《日＞／／年／月多日西北大学学位论文独创性声明本人声明：所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加标注和致谢的地，方外，本论文不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果也不包含为获得西北大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同王作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：谬部Ｐ文Ｐ／／年／月名日

5、Ｍ铜绿假单胞菌产鼠李糖脂的能力及其对炫类污染物降解的硏究摘要姪类污染物是指由碳和氨两种元素组成的对环境和生物体有危害作用的一类化合物，、巧ａ，如巧蔥、苯并巧、蒙、菲等；广泛分布于环境中不仅造成了上壤、空气、［］＂水源等的严重污染，对生物体还有致作用。常见的去除控类污染物的方法有物理法、化学法和生物法。生物法是通过微生物、植物或酶等彻底去除姪类污染物的方法，其中最理想的方法是微生物降解；然而，大多数炫类污染物都具有较强的疏水性，不易被微生物降解，是生物法去除姪类污染物面

6、临的瓶颈。微生物产生的表面活性剂能提高微生，物对多种有机化合物的降解效率，具有可生物降解性、高效性、低毒性等优势且不会造成环境的二次污染。因此，，生物表面活性剂的生产受到了广泛关注开发高效的微生物合成表面活性剂的方法具有重要的社会和环境效益。本实验室己从原油污染的王壤中获得了一株能高效降解怪类污染物且能产生表面６ＳＡ），活性剂的菌株，经１ｒＲＮ等鉴定为铜绿假单胞菌命名为ＤＮ，ＭＳ４０２１。在此基础上，本研究拟Ｗ铜绿假单胞菌ＤＮ１为出发菌株首先利用Ｐ质粒上发光基因的特性，采用快速高

7、通量筛选的方法对菌株ＤＮ１生产鼠李糖脂的ＢＰＬＭ无机盐培养基和培养条件进行了优化筛选。结果表明，ＢＰＬＭ培养基的最佳碳源为惊搁油６３．３４ｍｌ／Ｌ（Ｖ／Ｖ）、最佳氮源为ＮａＮ〇３５ｇ／Ｌ（Ｗ／Ｖ），碳氮比（Ｃ／Ｎ比）’°？？为２０时鼠李糖脂产量较高，最适温度为３２Ｃ３６Ｃ，最适ｐＨ值为５７。高通量筛选只需２化，相比传统培养培养时间缩短了近８０％，但培养基和培养条件优化结果与摇瓶一发酵生产鼠李糖脂的结果致。优化后的ＢＰＬＭ培养基摇瓶发酵培养菌株ＤＮ１生产鼠李糖脂的量为２６．０２ｇ／

8、Ｌ，比ＢＰＬＭ优化前的产量（１４．９７８ｇ／Ｌ）提高了７３．６１％。然后，ＢＰＬＭ培养基５００－ｍｌ摇瓶ＤＮ１生产鼠李糖脂通过甲醇优化的发酵菌株，氯仿法提－取，并采用ＨＰＬＣ和ＥＳＩＭＳ方法分析了菌株ＤＮ１所产鼠李糖脂的组成。结果表明，菌株ＤＮ１产生了１３种不同结构的鼠李糖脂６，其中占主要优势的种单鼠李糖脂分别为－－－－－－－－－－ＲｈａＣｓＣｓ、ＲｈａＣｉｏｉＣｓ、ＲｈａＣｉ４Ｃｉ６、Ｒ