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1、云南栽培玛咖抗氧化活性分析《食品科学》玛咖除含有多种营养成分外，还含有玛咖酰胺、玛咖烯、芥子油昔及其衍牛物、固醇等多种活性物质。动物实验和人体实验研究表明，玛咖具有抗疲劳、改善性功能、减少前列腺增牛、提高牛育能力等多种功效，且无毒、食用安全。Sandoval等［用0N00、DPP1LILO?以及去氧核糖降解的抑止作用来评价玛咖的水提液抗氧化作用，实验结果表明玛咖具有清除自由基的能力以及保护细胞DYA、对抗氧化压力的功效，作者推测可能是玛咖水提物小芥子油昔及其分解产牛的异硫報酸酯类物质发挥作用；此外，通过比较玛咖正己烷提取物、二氯甲烷提取物、乙酸乙酯提取物及甲醇提取物对DPPH清除作
2、用，发现貝有甲醇提取物可以明显抑制DPPH自由基，表现出抗氧化活性，因此认为玛咖屮的极性成分具有抗氧化作用。对栽培于云南的玛咖进行营养成份分析表明，引种玛咖与秘鲁产玛咖在营养成份指标上类似。木研究在此基础上对云南引种栽培玛咖的乙醇提物迸•行体外抗氧化试验，以期为云南栽培玛咖的开发利用提供科学依据1材料与方法1.1材料与试剂根据表皮颜色，分别采集种植于云南省乌蒙山区4个不同海拔地区(1976、2388、2790、3025m)的白色、黄色及紫色3个类型的玛咖块根,自然晒干后每种随机取样lkg,粉碎后过60FI后下冷藏备用。二苯代苦味胖基自由基(DPPH)、三毗噪三H丫嗪(tripyri
3、dyl-triazine,TPTZ)Sigma公司产品，其余为国产分析纯。4.1.2仪器与设备DU800紫外-可见分光光度计美国贝克曼公司。1.3方法1.3.1玛咖提取液的制备称取各粉碎后的玛咖样品20g,加入75%("0乙醇200mL,室温下超声提取30min,滤后滤渣再加200mL75%乙醇提取，共提取3次，合并滤液后减压浓缩，75%乙醇定容到100mL,0.45Pm滤膜过滤后备用。4.1.3.2玛咖乙醇提取物总还原能力测定采用铁离子总还原/抗氧化方法(Ferricreducing/antioxidantpower,FRAP法)。FRAP试剂：lOmmol/L的TPTZ(用40
4、mmol/L盐酸溶解)，20mmol/L的FeCl3-6H20和pH3.6的乙酸缓冲液以1:1:10的体积比混匀，在37°C下保温备用。标准曲线的绘制：分别吸取0.lmL不同浓度的FeS（L溶液，各加入3.9mLFRAP试剂，混匀后37°C下反应lOmin,测定593nm下吸光度。以吸光度为纵坐标，FeSO4浓度为横坐标，绘制标准曲线°样品测定:0.ImL样品中加入3.9mLFRAP试剂，混匀后37C反应lOmin,593nm下测定吸光度，以去离子水作为空白对照，样品还原能力以达到同样吸光度所需的FeS04的浓度表示。4.1.3.3玛咖乙醇提取物清除DPPH自由基能力测定0.4mm
5、ol/LDPPH乙醇溶液3.9mL与不同体积（10〜80uL）的样品混和,75%乙醇补充至4.OmL,充分混和后在暗处静置30min,517nm处测定其吸光度。清除率计算公式为:清除率/%=u-（A-儿）]/4）X100,式屮&为样品与DPPH反应后体系的吸光度；4为样品木身吸光度（以3.9mL乙醇替代DPPH）；A.为未加样品空白值（以0.ImL75%乙醇替代样品）的吸光度。根据清除率与加入样品体积的关系，计算出自由基清除率为50%吋样品的剂量（ICQ,15值反映样品对自由基的清除能力，15值越小，表明样品清除自由基的能力越强。1.3.4玛咖乙醇提取物清除•OH自由基能力测定采用
6、Fenton反应体系。10mL试管中依次加入0.5mL9mmol/LFeS04>0.5mL9mmol/L水杨酸-乙醇溶液及不同体积样品溶液（50〜200pL）,0.01mol/L磷酸缓冲溶液（PH7.4）补充至5mL,最后加0.5mL8.8mmol/LH202^动反应,379水浴反应30min,在510nm下测量各浓度的吸光度。清除率计算公式为:•0H清除率/%=[A-（4—/AX100式中，4）为未加样品（以75%乙醇代替样品）的空白对照液吸光度；川为加入玛咖提取液后反应体系的吸光度；4为不加氏。2的玛咖提取液（以蒸憾水代替HQ）本底的吸光度。1.3.5玛咖乙醇提取物清除超氧阴离
7、子（CL•）能力测定采用邻苯三酚自氧化法测定玛咖提取物的清除0•活性，邻苯三酚在碱性条件下自氧化形成6•,牛成有色屮间产物，当有抑制剂存在吋，可清除02•,从而阻止屮间产物的积累，由此可通过比色法检验物质清除6•的能力。具体方法为:0.05mol/LTis-HCl缓冲液（pH8.0,含1mmol/LEDTA）4.5mL中加入不同体积（40〜200yL）样品溶液,75%乙醇补充至4.6mL,混匀后置于25°C水浴中预热20min,再加入0.2mL6mmol/L邻苯三酚溶
