专题2 微生物的培养与应用 导学案.doc

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1、专题2微生物的培养与应用课题1微生物的实验室培养【目标导航】1.了解有关培养基的基础知识，掌握无菌操作技术的有关内容。2.了解消毒和火菌常用的方法及二者的区别。3.学会以大肠杆菌为材料进行微生物培养与分离纯化的方法。知识清单•一、培养基与无菌技术1・培养基（1）概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的0⑵成分：一般含有、、、,此外还要满足微生物对（即生长因了）、以及氧气的需求。【拓展深化】营养物质定义作用主要來源碳源能提供所需的物质构成生物体的和一些,有些是异养生物的无机化合物:CO'」、Na

2、llCOs等:有机化合物：糖类、脂肪酸、花生粉饼、石油等氮源能提供所需的物质合成蛋白质、核酸以及含氮的代谢产物无机化合物:N,NH.3、毀盐、硝酸盐等；有机化合物：尿素、牛肉膏、蛋白丿冻等特殊营养物质（生长因子）生长必不可少的悔和核酸的组成成分维生素、氨基酸、碱基等水在生物体内含最很高，在低等生物体内含量更高不仅是优良的溶剂，而且可维持生物大分子结构的稳定无机盐为微生物提供除碳、氮以外的各种重要元素细胞内的组成成分,生理调节物质,某些化能自养菌的能源，酶的激活剂（3）培养基的种类划分标准培养基种类特

3、点用途物理性质培养基加凝固剂，如琼脂半固体培养基观察微生物的运动、分类、鉴定培养基微生物、、活菌计数、保藏菌种化学成分培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产培养基培养基成分明确（用化学成分已知的化学物质配成）分类、鉴定用途培养基培养基中加入某种化学物质，以.不需要的微生物的生长，所需要的微生物的生长培养、出特定微生物（如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青每索或链霧索：培养固氮菌可用无氮培养基，如阿须贝培养基）培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品不同种类的微生物，如可用伊

4、红F蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌（若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽）注意:病毒目前不能利用人I「培养基来培养，需接种在动、植物纟R织细胞中才能繁殖。常用于培养病毒的是活鸡胚。2.无菌技术(1)概念：防止一切外来杂菌的侵入，并保持灭菌物品及无菌区域不再被污染的方法，称为无菌技术。注意:在微生物的实验室培养中，无菌技术的核心是,。(2)无菌技术的具体内容%1对实验操作的、操作者的进行清洁和消毒。%1将用于微生物培养的、接种用具和培养基等进行。%1为避免周围环境屮微生物的污染，实验操作应在

5、进行。%1实验操作时应避免已处理的材料用具与周围的物品相接触。(3)消毒和灭菌的概念%1消毒：消毒是指使用的物理或化学方法杀死物体表面或内部的(不包括芽砲和砲子)。%1灭菌：灭菌是指使用的理化因素杀死物体内外,包括。%1消毒与火菌的区别：两者最大的区别是。【拓展深化】某些细菌在其生长发冇后期，可在细胞内形成一个圆形的抗逆性休眠体，称为芽砲。每个细菌细胞仅形成一个芽砲，故它无繁殖功能。芽砲有极强的抗热、抗辐射、抗化学药物和抗静水压的能力。芽砲的休眠能力十分惊人，可保持几年到几十年的生活力。胞子是微生物

6、产生的一•种有繁殖或休眠作用的细胞。一般是单细胞，个体微小，通常是适应于从不利环境条件屮存活下来，并在条件改变时产生新的营养体，能直接发育成新个体。(4)消毒与灭菌的常用方法方法条件作用对象消毒—loor,煮沸5〜6min杀死微生物的营养细胞和一部分芽抱70〜75°C煮30min或80X?煮15min不耐高温的液体—70%的酒精对双手消毒50%的石炭酸、來苏水对空气消毒一定浓度的乳酸、食醋通过熏蒸对空气进行消毒紫外线法紫外线照射30min物体表面或空气中的微生物灭菌在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧对接种

7、环、接种针或其他金属工具灭菌，也可对试管「1、瓶口灭菌在干热灭菌箱内，160770°C条件下，加热1〜2h耐高温且需保持干燥的物品，如玻璃器川L和金属用具等在高压蒸汽灭菌锅内，121°C,100kPa,灭菌15~30min30W照射30min小型接种室、接种箱等二、实验操作(一)配制培养基1•配制原则(1)(根据微生物的种类、培养目的等)，如培养基可由简单的无机物组成；生产用培养基内可加入化学成分不明确的天然物质，而分类鉴定用培养基内必须加入已知化学成分的物质。⑵,注意各种营养物质的浓度和比例。(3

8、)，各种微生物适宜生长的pH范围不同，细菌6.5〜7.5、放线菌7.5〜&5、真菌5.0〜6.0。注意:①不同微生物对营养需求不同，因此，首先根据不同微生物的营养需求配制针对性强的培养基。②营养物质浓度过低不能满足微生物营养需要，过高对微生物的生长有抑制作用，另外，培养基屮备营养物质浓度比育•接影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成和积累，其屮碳氮比(C/N)的影响较大。例如，在谷氨酸生产中，当培养基屮的碳源与氮源的比为4：1时，菌体大量繁殖，而产生的谷氨酸少；当碳源与