“微生物的培养与应用”专题导学

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1、“微生物的培养与应用”专题导学　　微生物的培养与应用是学习的重点内容，也是高考中的核心知识考点，对于本部分内容的学习，把握住重点知识，对于提高应试非常重要，下面就对有关的知识进行分析，以飨读者。　　一、微生物的分离与培养　　1．培养基的分类和应用　　划分　　标准培养基种类特点用途物理　　性质液体培养基不加凝固剂工业生产固体培养基半固体培养基加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分类、鉴定微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种化学　　成分天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确

2、(用化学成分已知的化学物质配成)分类、鉴定用途选择培养基培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素；培养金黄色葡萄球菌，可在培养基中加入高浓度食盐)鉴别培养基根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如可用伊红―美蓝培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌(若有，菌落呈深紫色，并带有金属光泽)2.消毒和灭菌的区别13　　使用方法结果常用的方法消毒较为温和的物理或

3、化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法等灭菌强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌3.三种常用灭菌方法的比较　　灭菌方法适用材料或用具灭菌条件灭菌时间灼烧灭菌接种环、接种针或其他金属工具酒精灯火焰的充分燃烧层（外焰）直至烧红干热灭菌玻璃器皿(吸管、培养皿)和金属用具等干热灭菌箱内，160℃～170℃1～2h高压蒸　　汽灭菌培养基等高压蒸汽灭菌锅内100kPa，121

4、℃15～30min4.微生物的纯化培养及菌种的保藏　　(1)原理：在培养基上将细菌稀释或分散成单个细胞，使其长成单个的菌落，这个菌落就是一个纯化的细菌菌落。　　(2)方法：平板划线法、稀释涂布平板法。　　方法平板划线法稀释涂布平板法注意　　事项(1)接种环的灼烧：　　①第一次划线前：杀死接种环上的微生物，避免污染培养物　　②每次划线前：杀死残留菌种，保证每次划线菌种来自上次划线末端　　③划线结束后：杀死残留菌种，避免污染环境和感染操作者　　(2)灼烧接种环之后，要冷却后再进行操作，以免温度太高杀死

5、菌种　　(3)划线时最后一区域不要与第一区域相连13　　(4)划线用力要大小适当，防止用力过大将培养基划破(1)稀释操作时：每支试管及其中的9mL水、移液管等均需灭菌；操作时，试管口和移液管应在离火焰1～2cm处　　(2)涂布平板时：　　①涂布器用体积分数为70%的酒精消毒，取出时，让多余酒精在烧杯中滴尽，然后将沾有少量酒精的涂布器在酒精灯火焰上引燃　　②不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中，以免引燃其中的酒精　　③酒精灯与培养皿距离要合适，移液管管头不要接触任何物体目的在培养基上形成由单个菌种

6、繁殖而来的子细胞群体――菌落培养平板冷凝后倒置培养，使培养基表面的水分更好地挥发，防止皿盖上水珠落入培养基造成污染例1(2011?新课标卷)有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。请回答下面的问题。　　(1)在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于培养基。　　(2)纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即和。　　(3)为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小

7、，分解圈大说明该菌株的降解能力。　　(4)通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、和。无菌技术要求实验操作应在酒精灯附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。13　　解析(1)欲筛选出能降解原油的菌株，则培养基中应只含有原油而无其他碳源。不能降解原油的细菌则在此培养基上不能生存，这类培养基为选择培养基。(2)分离纯化菌种时，接种的方法有平板划线法和稀释涂布平板法，使聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，以便于纯化菌种。(3)降解原油能力越强的菌株，

8、在菌落周围形成的分解圈就越大。　　答案(1)原油选择(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)强(4)干热灭菌高压蒸汽灭菌火焰　　【知识拓展】(1)高温加热灭菌，其原理就是使细菌体内蛋白质变性，从而达到杀灭细菌的目的。　　(2)化学药剂的灭菌消毒方法，其作用原理是使细菌体内蛋白质变性，但是化学物质很难透过孢子或芽孢的坚硬外层进入细胞内，因此化学方法难以消灭孢子和芽孢。　　(3)体积分数为70%~75%的酒精杀菌效果最强。浓度过低，杀菌力弱；浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固形成一层保护膜，乙