三倍体牙鲆生物学性状和遗传多样性分析.pdf

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1、万方数据AnalysisofthebiologicaltraitsandgeneticdiversityoftriploidoliveflounderParalichthysolivaceusThesissubmittedto(墓ngdaoAgriculturalUniversityInFulfillmentoftheRequirementfortheDegreeofMasterofAgronomy1一一LiuHui(CollegeofAnimalScienceandVeterinaryMedicine)Supervisor:LiZhe

2、nYouFengZhuXiangpingQingdao.ChinaJune,2014万方数据独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得青岛农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均己在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:女,7时间:2护/牛年∥月/‘)日关于论文使用授权的说明本人完全了解青岛农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学

3、校有权保留送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意青岛农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。~始多,7鬈帆M年Ⅲ。日导师签名:李棂时间:知J牛年多月/D日万方数据青岛农业大学硕士学位论文摘要三倍体牙鲆生物学性状和遗传多样性分析摘要本研究对冷休克诱导的三倍体及对照组牙鲆的生长状况、营养成分以及骨骼形态进行了比较和分析;同时,采用微卫星分子标记技术对这两个群体的遗传多样性进行了研究。1、通过定期测量二倍体和三倍体的全长、体重等生长性状,比较了不同

4、倍性牙鲆的生长情况。在孵化后的11个月内,三倍体的全长和体重均高于二倍体,其中2、5、9月龄的三倍体全长和体重均显著高于二倍体(尸<0.05)。2、用x光照相技术对牙鲆骨骼形态进行观察。发JEY-,.--Y-养殖条件下,二倍体对照组和三倍体组均有脊椎畸形现象,常见的脊椎畸形有4种:椎体聚合、椎体单面压缩、椎体双面压缩和椎体移位,其中椎体聚合是最常见的脊椎畸形,56.7%的三倍体和33.3%的二倍体都出现椎体聚合:在二倍体和三倍体中,第8.16块和尾部最后10块区域内的椎骨畸形率均较高。总体来说,三倍体牙鲆的骨骼畸形率显著高于二倍体(三倍

5、体,60.0%;二倍体,33.3%,P<0.05),三倍体发生脊椎畸形的个体数和各种畸形出现的次数也均高于二倍体。3、对三倍体牙鲆肌肉的营养成分进行测定,并与二倍体进行比较。结果表明,二倍体和三倍体肌肉营养成分总体差异不大,其中水分、蛋白质、脂肪、灰分含量均没有显著差异。二倍体和三倍体含有相同种类的氨基酸和脂肪酸。三倍体肌肉中的蛋白质、饱和脂肪酸、多不饱和脂肪酸和必需氨基酸含量高于二倍体,但是差异并不显著。三倍体的16:00、20:4∞6、EPA三种脂肪酸含量显著低于二倍体俨<0.05),Thr、Gly、Arg、18:1c07、20:2

6、国6、DHA含量显著高于二倍体(尸<0.05)。4、采用微卫星遗传标记技术对冷休克诱导的三倍体群体及二倍体对照群体进行比较分析,取培育至11月龄三倍体及同期二倍体对照矛鲆个体各32尾,通过高盐法提取肌肉组织总DNA,利用筛选得到的21对微卫星引物进行PCR扩增,并经14%聚丙烯酰胺凝胶电泳进行分型后,进行人工判读和分析。结果显示,21个微卫星位点均为多态,二倍体和三倍体群体的平均等位基因数a)、基因型.6-数、平均有效等位基因数池)、平均观测杂合度(㈨和平均期望杂合度(玩)分别为5.6和5.0,190和142,3.7和2.8,0.613

7、和0.868。0.681和O.629。二倍体和三倍体群体的多态信息含量(PIC)分别为O.642和O.589,个体识别率㈤为O.660和0.609,非父排除率㈣为0.482和0.399,其累积个体识别万方数据青岛农业人学硕士学位论文摘要率和非父排除率均达到0.999,表明所选座位均属中高识别力的遗传标记,可以将它们应用于今后牙鲆雌核发育群体的遗传变异分析以及进一步的遗传育种的研究中。二倍体和三倍体群体间的遗传距离(D)为0.312,遗传相似系数(D为O.732,基因分化系数(Gsr)为O.971。以上结果说明三倍体诱导对矛鲆的遗传结构造

8、成了一定影响,导致三倍体遗传多样性水平相对二倍体有所下降,二倍体和三倍体牙鲆的基因型存在一定差异。关键词:牙鲆:三倍体;诱导:生物学特性:遗传多样性万方数据青岛农业大学硕士学位论文AbstractAnaly

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