[精品]霉菌的形态观察 山东大学.doc

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1、图2青霉的基本形态足细胞图4曲霉的基本形态霉菌的形态观察【实验目的】1.掌握霉菌的形态观察法——小室培养法；2.了解四类常见的霉菌（青霉，毛霉，根霉，曲霉）的形态。【实验原理】A、■菌霉菌可产生复杂分枝的菌丝体，其菌丝分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生抱了。霉菌菌丝体（尤其是繁殖菌丝）及也了的形态特征是识别不同种类霉菌的重要依据。霉菌菌丝和殖了的宽度通常比细菌和放线菌粗得多（约3〜10urn）,常是细菌菌体宽度的儿倍至儿十倍，因此，用低倍显微镜即可观察。木实

2、验采用毛霉、青霉，曲霉,根霉四种常见的霉菌作为菌种进行观察。毛霉又叫黑霉、长毛霉。接合菌亚门接合菌纲毛霉目毛霉科真菌屮的一个大属。以砲囊砲了和接合砲了繁殖。菌丝无隔、多核、分枝状，在基物内外能广泛蔓延，无假根或匍匐菌丝。不产生定形菌落。菌丝体上育接生出单生、总状分枝或假轴状分枝的砲囊梗。各分枝顶端着生球形也了囊，内有形状各异的囊轴，但无囊托。囊内产大量球形、椭圆形、壁薄、光滑的饱囊抱子。抱了成熟后泡了囊即破裂并释放砲了。有性生殖借异宗配合或同宗配合，形成一个接合砲了。（如右图所示）青霉菌属多细胞，营

3、养菌丝体无色、淡色或具鲜明颜色。菌丝有横隔，分生抱了梗亦有横隔，光滑或粗糙。基部无足细胞，顶端不形成膨大的顶囊，其分生砲了梗经过多次分枝，产生儿轮对称或不对称的小梗,形如扫帚，称为帚状体。分生砲了球形、椭圆形或短柱形，光滑或粗糙,大部分生长时呈蓝绿色。有少数种产生闭囊壳，内形成了囊和了囊抱了,亦有少数菌种产生菌核。（如右图所示）根霉的菌丝无隔膜、有分枝和假根，营养菌丝体上产生匍匐枝，匍匐枝的节间形成特有的假根，从假根处向上丛生直立、不分枝的殖囊梗，顶图3根霉的基本形态端膨大形成圆形的他了囊，囊内产生

4、抱囊抱了。他了•囊内囊轴明显，球形或近球形，囊轴基部与梗相连处有囊托。根霉的砲子可以在固体培养基内保存，能长期保持生活力。此外有性生殖时还可以产生接合他了囊，无性生殖时产生芽抱了。（如右图所示）曲霉菌丝有隔膜，为多细胞霉菌。在幼小而活力旺盛时，菌丝体产生大量的分生砲了梗。分生抱了梗顶端膨大成为顶囊，一般呈-球形。项囊表面长满一层或两层辐射状小梗（初生小槌与次生小槌）。最上层小梗瓶状，顶端着生成串的球形分生抱了。以上几部分结构合称为“雀了穗“。抱了呈绿、黄、橙、褐、黑等颜色。这些都是菌种鉴定的依据。分

5、生砲子梗生于足细胞上，并通过足细胞与营养菌丝相连。曲霉抱了穗的形态，包括分生砲了梗的长度、顶囊的形状、小梗着生是单轮还是双轮，分生砲了的形状、大小、表面结构及颜色等，都是菌种鉴定的依据。（如右图所示）B、小室培养法)和根霉(Rhizopussp.)培观察霉菌的形态有多种方法，常用的有直接制片观察法、载玻片培养观察法和玻璃培养观察法三种方法，木次实验采用载玻片培养观察法（小室培养法）。用无菌操作将培养基琼脂薄层置于载玻片上，沿琼脂边缘接种后盖上盖玻片培养，霉菌即在载玻片和盖玻片之间的有限空间内沿盖玻片

6、横向生长。培养一定时间示，将载玻片上的培养物置于显微镜下观察。这种方法既可以保持霉菌白然生长状态，还便于观察不同发疔期的培养物。（如右图所示）【实验器材】1、菌种:曲霉(Aspergillussp.),青霉(Penicilliumsp.),毛霉(Mucorsp.养48h的马铃萼琼脂（PDA）斜面培养物。2、培养基及试剂：马铃薯琼脂（PDA）,20%甘汕（无菌），乙醇。3、仪器及其它用品：无菌操作台，解剖刀，錢了，无菌吸管，U型玻璃棒，普通光学显微镜、擦镜纸、绸布、酒精灯、载玻片、接种针、培养皿等【操

7、作步骤】A.实验流程培养基灭菌、的配制卩'宓1!牙A接种》>镜检B.详细步骤1.培养基的配制马铃薯培养基（PDA）配方马铃蒋200g蔗糖（或衙萄糖）20g琼脂15—20g水lOOOmLpH自然按如上所示配方称取PDA各组分，先将马铃薯去皮，切成小块称取30g丸沸半小时，然后先用1层纱布滤去未溶解的固体，再用6层纱布过滤，将滤液体积用无菌水调至150mL,然后再加入糖及琼脂，加塞后用牛皮纸包好，准备灭菌。2.培养基及装置的灭菌a）灭菌准备制作八个平皿，在每个平皿皿底铺一张略小于皿底的圆滤纸片，再放一U

8、形玻棒，其上放一洁净载玻片和四块盖玻片，盖上皿盖、再与两个空平皿一起用牛皮纸包好；在lOOmL锥形瓶屮用甘油配制20%的甘汕，加塞包好；最后取10汕移液管两支用牛皮纸包好。b）灭菌将上述用牛皮纸包好的仪器与试剂连同配好的PDA培养基一并放入灭菌锅屮110°C灭菌30min（由于培养基屮有葡萄糖，为防止由于高温而使糖发生糊化而变质，灭菌温度不宜过高）。3.制作琼脂薄片将制作琼脂薄片与接种所需的培养基，仪器，以及菌种放入无菌操作台，打开紫外线照约5min,然后打开照明与风