利用甘油生产1,3-丙二醇的混菌筛选及发酵.pdf

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1、犬裡－大＇爱ＤＡＬＩＡＮＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＯＦＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹｆｉＳ５士孝位文ＭＡＳＴＥＲＡＬＤＩＳＳＥＲＴＡＴＩＯＮ＜ＯＩＩ利用甘油生产１３－，丙二醇的混菌箣选及发酵微生物学学禾斗专业作者姓名忌教肺修志龙教授指２０１５年６月９曰答辩日期———硕士学位论文１３－利用甘油生产，丙二醇的混菌简选及发酵－ｃｅｒｏＳｃｒｅｅｎｉｎａｎｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆ１，３ｐｒｏｐａｎｅｄｉｏｌｆｒｏｍｌｙｌｇｇｂｍｉｘｅｄｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆＫｌｅｂｓｉｅｌｌａｎｅｕｍｏｎｉａｅ

2、ｙｐ作者姓名：刘会芳学科、专业：微生物学学号：２１２１８０７７指导教师：修志龙教授完成日期：２０１５．５大遠理工大摩ＤａｌｉａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ大连理工大学学位论文独创性声明作者郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下进行研究工作所取得的成果。尽我所知，除文中巳经注明引用内容和致谢的地方外，本论文不包含其他个人或集体已经发表的研究成果，也不包含其他已申请学位或其他用途使用过的成果一同工作的同志对本研究所做的贡献。与我均巳在论文中做了明确的说明并表示了谢意。若有不实之处。

3、，本人愿意承担相关法律责任函Ｉ始屈菌雄及沒辦．学位论文题目：制闲ｇ／作者签名：日期：？ｉ年Ｚ月？日＿＾大连理工大学硕士学位论文摘要－３－ＰＤＯ微生物发酵法生产１３两二醇（１，）因其绿色环保而备受关注。目前主要利，３－ＰＤ０用单菌发酵生产１，但因其底物耐受性差、产物转化率低、副产物多、产品分离，－难及易受唾菌体感染等问题，限制了１３ＰＤ０，的大规模工业化生产。混菌发酵具有多菌共生酶系互补的优点，但目前主要局限于传统的食品、废水处理和沼气生产等领域，关３－ＰＤＯ的文献报道较少于混菌发酵生产１，。针对这些问题，本论文以混菌发酵甘油生产－１３ＰＤ０，

4、，，，为出发点从大连海域取样蹄选理想混菌对其分离纯化与鉴定并研究了菌株的发酵特性。首先一，从大连海域采集藤壶、海藻、海绵和海泥样品４０份，以甘油为唯碳源，１６组－从样品中蹄选出能代谢甘油的菌株，其中选自海泥的混菌ＮＨＮ８具有１ＰＤＯ产，３量相对较高、发酵性能稳定的特点。其次，对蹄选的混菌ＮＨＮ８进行了分离纯化与鉴定，结果显示：混菌ＮＨＮ８由三株克雷伯氏杆菌Ｗ３、Ｙ１和Ｙ５组成，己保藏于中国普通微生物菌种保藏管理中心，保４４０藏号分别为ＣＧＭＣＣＮＯ．１０、１０４３９和１０４３８。再次，对三株单菌的形态和发酵特性进行了观察和研究。克雷伯氏杆菌Ｗ３的菌落

5、－－１平滑呈乳白色，生长较快，主产物是３ＰＤ０，产少量２３，，丁二醇；克雷伯氏杆菌Ｙ１一的菌落含大而单的气泡，生长比较缓慢，主产物是乙醇Ｙ５的；克雷伯氏杆菌菌落含３－小而致密的气泡，，生长速度介于Ｗ和Ｙ１之间主产物是１３ＰＤＯ和乙醇Ｙ１和Ｙ５，；均不产２３－二，丁醇。最后，研宄了甘油浓度和接种比例对混菌发酵的影响，结果显示，混菌具有良好的？底物耐受性，混合发酵的甘油起始浓度为４０２００／Ｌ，优选１２０／Ｌｇ。克雷伯氏杆菌Ｗ３、ｇＹ？？？１和Ｙ５的接种比例为１５０２５０：１０２０：５０１００，优选比例为２０８：】７：８２。一实验表明，，混菌发酵克服了单菌株底

6、物耐受性差的缺点，提高了生产效率产物－－２３二，避免了后期分离中的难题不含，混菌可耐受甘油浓度达到／，，丁醇２００ｇＬ１３ＰＤＯ，８－产量达到１．４０／Ｌ？该方法有望为微生物发酵法生产１３ＰＤ０的工业化提供简单经济的ｇ，发酵工艺。－１ＰＤＯ关键词：３混囷；；克雷伯氏杆囷；甘油，－－Ｉ利用甘油生产３－１丙二醇的混菌蹄选及发酵，－Ｓｃｒｅｅｎｉｎａｎｄｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｆ１３ｒｏａｎｅｄｉｏｌｆｒｏｍｌｃｅｒｏｌｇ，ｐｐｇｙｂｙｍｉｘｅｄｃｕｌｔｕｒｅｓｏｆＫｌｅｂｓｉｅｌｌａｎｅｕｍｏｎｉａｅｐＡｂｓｔｒａｃｔｅｎ

7、ａｏｎｏｆ－ｓｔｔｒａｃｔｅｓｅｓｒｅｅｎＭｉｃｒｏｂｉａｌｆｅｒｍｔｔｉ１３ＰＤＯｈａａｄｍｕｃｈａｔｔｅｎｔｉｏｎｂｅｃａｕｏｆｉｔ，ｇｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ．Ｕｐｔｏｄａｔｅｍｏｓｔｒｅｓｅａｒｃｈｅｓｈａｖｅｆｏｃｕｓｅｄｏｎｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎｏｔｉｍｉｚａｔｉｏｎｏｆ，ｐ－１３ＰＤＯｕｓｉｎｕｒｅｃｕｌｔｕｒｅ．Ｈｏｗｅｖｅｒｕｒｅｃｕｌｔｕｒｅｈ