血凝分析ppt课件.ppt

《血凝分析ppt课件.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第四章血凝分析主讲：1第一节血凝分析理论知识一、血管壁的止血功能(P153)二、血小板的止血功能(P155)三、抗凝及纤溶系统(P156)2一、生理性止血的基本过程1、血管收缩2、血小板血栓形成3、血液凝固血液凝固是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成的凝血酶最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。因此，凝血过程可分为凝血酶原酶复合物的形成、凝血酶原的激活和纤维蛋白的生成三个基本步骤。出血与凝血机制3出血与凝血机制生理性止血过程示意图5HT：5羟色胺，TXA2:血栓烷A24二:凝血过程凝血酶原酶复合物可通过内源性凝血途径和外源性凝血途径生成。胶原5凝血途

2、径（简化）371298纤维蛋白原：1Fibrin21110+5凝血酶原6第二节仪器检测原理血凝仪可进行血栓与止血的实验室检查。可为出血性和血栓性疾病的诊断、溶栓以及抗凝治疗的监测及疗效观察提供有价值的指标。7血栓与止血的基本检测指标：PT凝血酶原时间APTT活化部分凝血活酶时间FIB纤维蛋白原TT凝血酶时间D-DimerD-二聚体AT-Ⅲ抗凝血酶ⅢⅡⅤⅦⅩ内原性凝血因子ⅧⅣⅥⅫ外原性凝血因子PC蛋白CPS蛋白S8血凝仪基本检测方法凝固法底物显色法乳胶凝集法免疫法主要检测方法9血凝仪检测原理（二）底物显色法生物化学法：以底物释放产色基团量的变化测定有

3、关因子（一）凝固法生物物理法电流法——纤维蛋白原——纤维蛋白——导电光学法散射比浊法——凝固过程中散射光变化透射比浊法——凝固过程中吸光度变化浊度变化光度变化双磁路磁珠法——钢珠振幅衰减程度判断终点光电磁珠法——吸光度衰减程度判断终点（三）免疫学法抗原抗体免疫扩散法火箭电泳双向免疫电泳免疫比浊ELISA法直接比浊乳胶比浊散射比浊透射比浊10生物物理法生物物理法亦可称为凝固法。通过检测血浆在凝血激活剂的作用下光、电、机械运动等一系列变化，再由计算机采集分析数据得出最终结果。由于是检测血浆在凝固过程中的物理变化，因此该法也可称为生物物理法。电流法(已淘

4、汰)当一定时间后血浆中纤维蛋白形成，电极向上移动时可钩起纤维蛋白丝。此时由于纤维蛋白丝的存在，电路仍处于接通状态即可判断为凝固终点。11散射比浊法散射比浊法当待测血浆中纤维蛋白凝块形成时，来自发光二极管的光被其散射。接收器接收散射光并将其转变成电信号。生物物理法光学法光学测定法是通过测定血浆在加入激活剂后浊度的变化来测定测定凝血时间的。可分为散射比浊法和透射比浊法两种。12散射比浊法由经过放大处理后的电信号产生的血浆凝固曲线如图所示。取整个测量过程中随时间变化的散射光强度为100%，计算从测定开始至散射光强度增加到50%时所对应的时间为凝固点。13

5、透射比浊法透射比浊法的光源与接收器呈直线排列。当待测血浆中纤维蛋白凝块形成时，来自发光源的光强度被其吸收。接收器将变化的光强度转变成电信号。仪器的数据处理部分连续记录样品的吸光度变化曲线，计算出单位时间内吸光度的变化量，并以每分钟吸光度的变化量来报告结果。14生物物理法双磁路磁珠法在待测血浆中加入小铁珠，如图所示。测试杯两侧的驱动线圈产生一恒定的交变电磁场，使杯内的小钢珠保持等幅运动。凝血激活剂加入后，纤维蛋白的产生增多，血浆的粘稠度增加，迫使小钢珠的运动幅度逐步减弱。当运动幅度衰减到先前的50%时，可确定为凝固终点。15磁珠法检测系统简介磁珠法检

6、测用于凝固法是Stago的专利技术，如图所示。一旦被测血浆开始凝固（加入激活试剂）血浆黏度增加使钢球的运动速度减慢，振幅减小。测量线圈检测到此振幅的变化并通过计算得到凝血时间。16生物化学法这类方法主要是通过测定产色物质的吸光度变化，以推算待测物质的含量。这类方法也称为底物显色法。人工合成可以被待测凝血活酶催化裂解的多肽底物，且多肽底物连接上产色物质。在检测过程中产色物质可被解离下来，使被检样品中出现颜色变化，根据颜色变化可推算出被检凝血活酶的活性。产色物质一般选用连接对硝基苯胺（PNA）。游离的PNA呈黄色，其测定波长选用405nm。17生物化学

7、法凝血分析仪使用产色物质在检测血栓／止血指标时的生化反应对酶的检测如下所示：在含酶的样品中直接加入合成物质，因为酶可裂解合成物质释放PNA，监测由于PNA释放而导致被检样品在405nm处光吸收的变化，就可推算样品中酶的活性。如对凝血酶、纤溶酶等的检测凝血酶样本多肽+PNA合成物质间接得到酶的含量光电比色18免疫学方法免疫学方法是以被检测物质作为抗原，然后用免疫动物的方法制备相应的抗体，利用抗原抗体的特异性结合反应来对被检测物质进行定量检测。自动凝血仪多采用免疫比浊法。19三、血凝仪的基本结构1.半自动血凝仪的基本结构样本预温槽试剂预温槽加样器检测系

8、统（光、磁）微机202、全自动血凝仪的基本结构1.样本传送及处理装置样本传送及处理装置通常包括：自动进样系统、自动穿盖系统