植物组培复习总结.docx

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1、第一章植物细胞组培：在离体条件下利用人工培养基对植物器官、组织、细胞原生质体等进行培养，使其长成完整株体。类型1器官培养2茎尖分生组织培养3愈伤组织培养4细胞培养5原生质体培养植物组培特点:1培养条件可认为控制2生长周期短，繁殖率高3管理方便，利用工厂化生产和自动化控制植物细胞全能性：每个植物体细胞或性细胞都具有该植物的全套遗传基因，因此在一定条件下培养都可发育成一个与母体一样的植株。植物细胞变现全能性必须经过的步骤:成熟细胞——分生细胞——胚状体——完整植株成熟细胞——愈伤组织——出根出芽——完整植株愈伤组织:原

2、本指植物受伤后在表面形成的一团薄壁细胞。植物组培中特指人工培养基上形成的无数生长的薄壁细胞。脱分化：已经完全分化定型的细胞，经过诱导成为重新恢复分裂能力的细胞的过程。诱导细胞脱分化是处于抑制的，需要外接条件刺激，在各条件中，激素起重要作用。4类植物1有些植物只需生长素——IAA吲哚乙酸NAA萘乙酸2,4-D如菊苣2有些仅需细胞激动素萝卜大豆3须加细胞激动素和生长素烟草胡萝卜马铃薯4不需加任何激素烟草愈伤组织再分化：植物成熟细胞经过脱分化后（形成愈伤组织后），由愈伤组织再形成完整植株的过程。植物组培过程取组织——形成

3、愈伤组织——幼胚——植物幼体——成熟植株脱分化再分化*以高度分化的动物体细胞的细胞核具有全能性植物组培动物组培原理植物细胞全能性细胞增殖培养基性质固体培养基液体培养基培养基特有成分蔗糖、植物生长调节剂葡萄糖、动物血清培养结果植物植株细胞系、细胞株培养目的快速繁殖、培育无病毒植株等获得细胞或细胞分泌物植物组培发展简史探索阶段施莱登施旺创立细胞学说提出理念细胞学说要点1动植物均由细胞组成2所有细胞来自其他细胞3卵和精子是细胞4单个细胞可分裂形成组织5细胞遗传全能性；组培技术哈勃兰特成功培育出植物提供理论基础奠基阶段怀特

4、配制出培养基认识到维生素和植株激素在植物组培中的重要作用崔徵用不同种类和比例植物激素处理离体培养的烟草茎段和髓发现腺嘌呤和生长素的比例是控制芽和根形成的主要条件之一斯图尔特证实哈波兰特50年前理论正确性快速发展阶段MS培养基PEG原生质体融合法植物遗传转化体细胞无性系变异人工种子植物组培应用1增加遗传变异性，改良作物2繁殖植物无性系：组培中从一个单细胞、一块愈伤组织、一个芽等器官都可获得无性系。无性系就是用植物体细胞繁殖所得的后代。植物组培的无性系5种原球茎经原球茎形成植物兰花愈伤发生型细胞或愈伤组织通过不定芽形成

5、植株烟草愈伤组织胚状体发生型细胞或愈伤组织通过胚状体胡萝卜体细胞培养器官型离体茎花芽等直接产生小植株百合无菌短枝扦插腋芽，连同短枝经灭菌后在无菌条件下培养，使其生根3有用化合物的工业化生产培养物低温贮藏和种质库的建立生物科学的发展三大成就生苦克隆技术基因工程干细胞技术植物基因工程技术发展对植物育种影响核心DNA重组技术T-DNA转化原理植物细胞全能性通过揭示T-DNA转化原理，改造Ti质粒并构建植物表达载体系统，诱导转基因细胞分化。发展最快领域。克隆广义一个细胞个体无性繁殖产生的后代基因克隆是指基于大肠埃希菌的DN

6、A片段（或基因）的扩增过程目标DNA的获得、重组载体的构建、受体细胞的转化以及重组细胞的筛选和繁殖植物遗传转化：将外源基因转移到植物体内稳定的整合、表达与遗传的过程先决条件建立稳定高效的转化体系主要方法农杆菌法基因枪法花粉管通道法显微注射法电击法聚乙二醇法基因组学：最早指基因组作图和测序。后来经发展科学家定义为研究生物基因组的结构和功能的科学。分为结构基因组学和功能基因组学两大部分。DNA分子标记直接分子水平检测DNA差异DNA水平上遗传变异的直接反应现在有数十种对植物育种影响筛选分子标记，构建分子标记遗传图普，为

7、植物育种，特别是数量性状遗传育种提供参考第二章基本设备：超净工作台植物组培用具培养基配置用具——烧杯容量瓶量筒移液器培养用具——试管三角瓶培养皿封口膜接种用具——酒精灯镊子喷雾器解剖刀用具洗涤——洗涤剂酸洗转基因废弃物必须灭菌用具灭菌——干热灭菌酒精灼烧过滤0.2um小型器具——分注器血球计数器移液器过滤灭菌器常用仪器——酸度计天平磁力搅拌器高压蒸锅灭菌器干燥灭菌箱离心机电冰箱摇床培养箱显微镜培养室洁净培养架植物生长专用灯25℃70%-80%湿度培养室和接种室灭菌2%新杰尔敏擦洗75%乙醇喷雾UV照射20MIN（紫

8、外）器皿和接种工具灭菌解剖刀镊子剪刀等采用干热灭菌法烘箱灭菌120℃1H外植体灭菌原则：充分灭菌不损伤外植体不同外植体灭菌要求不一样常用方法75%乙醇（无毒湿润植物）氯化汞（有残毒）次氯酸钠（无害）培养基灭菌方法高温高压蒸汽灭菌过滤灭菌植物组织培养基主要成分：水无机成分大量元素NPKCa（平衡体内离子）MgS微量元素铁硼猛锌铜钼钴氯有机物质硫胺素VB1盐酸吡