植物组培方案

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1、绿萝叶片和茎段离体愈伤组织培养及继代培养三组实验设计方案1、实验目的(1)通过本次实验，进一步熟悉配制培养基的流程及操作中应注意的事项，学会设计和筛选绿萝愈伤组织诱导培养基配方。(2)通过本次实验，能够熟练掌握外植体的表面消毒技术和无菌操作技术。(3)通过本次实验，能够熟练掌握愈伤组织继代培养的基本操作技术，进一步熟悉、规范无菌操作技术。2、实验流程配置绿萝叶片和茎段愈伤组织诱导培养基——►接种绿萝叶片和茎段诱导愈伤组织产生——►配罝绿萝叶片和茎段愈伤组织增殖培养基——►接种绿萝叶片和茎段愈伤组织进行增殖——►实验结果观察记录3、实验设备及材料(1)实验用具和仪器冰箱

2、、普通天平、三角瓶、移液管、量筒、烧杯、容量瓶、玻璃棒、陶瓷缸、精密pH试纸(pH5.4~7.0)、药勺、称量纸、标签纸、封口膜、橡皮筋、棉线、电炉、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉等。酒精棉球、小块纱布、己火菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已火菌培养皿、酒精灯、超净工作台、恒温培养箱、100ml三角瓶、1000ml搪瓷杯、50ml量筒、1ml、2ml、5ml、10ml吸管等。(2)药品和试剂：MS培养基母液配制试剂、琼脂、蔗糖、生长调节物质、蒸馏水、lmolClHCl、lmol-L_1NaOH>绿萝叶片和茎段组织诱导培养基、无菌水、75%酒精、0.l%HgCl2，、愈伤组织

3、继代培养基、蒸馏水等。(3)材料：绿萝叶片和茎段4、外植体选择绿萝，属天南星科，是常绿藤植物。枝繁叶茂，嫩绿有光泽，有极好的观赏价值。还能吸附和去除室内空气中的甲醛、苯、三氯乙烯等污染物，是天然的“空气净化器”。叶片光滑无绒毛，用作植物组培外植体时消毒较容易。5、培养基及配制绿萝叶片诱导愈伤组织的培养基：MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L绿萝茎段诱导愈伤组织的培养基：1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+2,4_D0.8mg/L愈伤组织分化的培养基：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L生根培养基：1/2MS+6-BA0

4、.1mg/L+IBA0.2mg/L(一)大量元素母液制备表1MS培养基大量元素母液制备序号药品名称培养基浓度(mg/L)扩大20称量(mg)1NH漏1650330002KNO,190038000蒸榴水定3CaCl2•211,04408800容至绿萝叶片和茎段离体愈伤组织培养及继代培养三组实验设计方案1、实验目的(1)通过本次实验，进一步熟悉配制培养基的流程及操作中应注意的事项，学会设计和筛选绿萝愈伤组织诱导培养基配方。(2)通过本次实验，能够熟练掌握外植体的表面消毒技术和无菌操作技术。(3)通过本次实验，能够熟练掌握愈伤组织继代培养的基本操作技术，进一步熟悉、规范无菌

5、操作技术。2、实验流程配置绿萝叶片和茎段愈伤组织诱导培养基——►接种绿萝叶片和茎段诱导愈伤组织产生——►配罝绿萝叶片和茎段愈伤组织增殖培养基——►接种绿萝叶片和茎段愈伤组织进行增殖——►实验结果观察记录3、实验设备及材料(1)实验用具和仪器冰箱、普通天平、三角瓶、移液管、量筒、烧杯、容量瓶、玻璃棒、陶瓷缸、精密pH试纸(pH5.4~7.0)、药勺、称量纸、标签纸、封口膜、橡皮筋、棉线、电炉、高压蒸汽灭菌锅、电磁炉等。酒精棉球、小块纱布、己火菌滤纸、枪状镊子、手术剪、解剖刀、已火菌培养皿、酒精灯、超净工作台、恒温培养箱、100ml三角瓶、1000ml搪瓷杯、50ml量筒

6、、1ml、2ml、5ml、10ml吸管等。(2)药品和试剂：MS培养基母液配制试剂、琼脂、蔗糖、生长调节物质、蒸馏水、lmolClHCl、lmol-L_1NaOH>绿萝叶片和茎段组织诱导培养基、无菌水、75%酒精、0.l%HgCl2，、愈伤组织继代培养基、蒸馏水等。(3)材料：绿萝叶片和茎段4、外植体选择绿萝，属天南星科，是常绿藤植物。枝繁叶茂，嫩绿有光泽，有极好的观赏价值。还能吸附和去除室内空气中的甲醛、苯、三氯乙烯等污染物，是天然的“空气净化器”。叶片光滑无绒毛，用作植物组培外植体时消毒较容易。5、培养基及配制绿萝叶片诱导愈伤组织的培养基：MS+6-BA3.0mg

7、/L+NAA0.3mg/L绿萝茎段诱导愈伤组织的培养基：1/2MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.4mg/L+2,4_D0.8mg/L愈伤组织分化的培养基：MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.5mg/L生根培养基：1/2MS+6-BA0.1mg/L+IBA0.2mg/L(一)大量元素母液制备表1MS培养基大量元素母液制备序号药品名称培养基浓度(mg/L)扩大20称量(mg)1NH漏1650330002KNO,190038000蒸榴水定3CaCl2•211,04408800容至4MgSO.,•7H2O37074001000ml5KH2PO,17