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1、植物组织培养-红金银花组织培养试验研究红金银花组织培养试验硏究世界上忍冬属植物有200多种'我国有98种，约占世界总数的50%,其中以西南部为主产区。金银花生长快，寿命长，其生理特点是更新性强,老枝衰退新枝很快形成。红金银花是金银花的变种,花蕃、叶、茎均为红色，花蕃为红色，花开后变成红、黄、白相间，赏心悦目，花色艳丽，香味浓郁。该试验对红金银花的组织培养试验进行了研究，为红金银花在山东地区乃至全国快速推广应用，发挥其园林绿化功能，提供了基础性和技术性支持。1材料和方法1.1材料试验所用材料为当年生红金银花中、上部的枝条，采集时间
2、是春季，取自青岛平度地区。将取回的红金银花枝条放入水槽中,用软毛刷刷洗枝条的表面，自來水冲洗，将尘土冲洗干净。剪取顶芽部位1.0〜2.0eg放入洗涤液或洗衣粉溶液屮浸泡15-20min，再用自来水将洗涤液冲洗干净。在超净工作台下，先用75%的酒精浸泡30s，用无菌水冲洗1〜2次，再用0.2%的升汞溶液灭菌3〜5min,用无菌水冲洗5〜6次。备用。1.2方法切取已经灭菌的红金银花顶芽部位1.0〜2.0cm作为外植体，接种到以MS为基本培养基，添加0.5、1.0、2.0、4.0mg/L的6・BA和0、0.1、0.2、0.4mg/L的
3、NAA以及10、20、30、40g/L的蔗糖的初代培养基上。当初代培养的芽长到3.0〜4.0cm时,将其转接到以MS为基本培养基，同时添加1.0、1.5、2.0mg/L的6-BA和0.1、0.2、0.4mg/L的NAA以及0、0.5、l.Omg/L的GA3的继代培养基上。另添加LH0.2g/L,蔗糖20.0g/Lo当继代培养的芽生长较健壮(高4.0-5.0cm)后,先将其从基部切下转接到只含MS的空白培养基上，培养1周后再接到生根培养基上，生根培养基以1/2MS为基本培养基，同时添加0、0.25、O.5mg/L的6・BA和0.5
4、、1.0、2.0mg/L的NAA以及0、1.0、2.0g/L的活性炭。另添加蔗糖20.0g/L。以上试验均采用正交试验设计。琼脂7.0g儿pH5.8~6.2o每处理30个外植体，重复3次。培养期间光照强度保持1500-2000lx,光照吋间为12-14h/d,控制温度23~25°Co2结果与分析2.1不同因素对初代培养的影响观察试验,发现各个处理的出现顶芽萌发现象均较慢，并且发现蔗糖浓度对试验也有较大影响。蔗糖浓度较高的处理，芽萌动后生长速度较快/旦培养10d左右，从顶芽基部切口处出现大量愈伤组织,影响上部吸收营养及正常生长。蔗
5、糖浓度较低的处理，芽的萌动和生长速度较慢/旦愈伤组织的生成量很少，不影响芽吸收营养及正常生长。此试验结果与仇键等对蒙花1、2号金银花组培试验结果相似。诱导率二诱导数/(接种总数・污染数・死亡数)X100%。从表1可以出,6・BA、NAA和蔗糖对红金银花顶芽的初代培养均有影响/旦各因素Z间的影响有差异。试验发现,不添加NAA的培养基,对诱导红金银花顶芽的培养效果较添加NAA培养基的效果差，芽的诱导缓慢,生长势较弱，甚至有枯死现象。而添加NAA的培养基,明显促进芽的诱导，提高了芽的诱导率。不同浓度蔗糖对顶芽诱导率的影响（极差值为14
6、.39）小于不同浓度6-BA的影响（极差值为21.86）,同时小于不同浓度NAA的影响（极差值为22.60）,即NAA为最大影响因素。当62BA浓度为1.0mg/L时诱导率达到最大为84.10%;当NAA的浓度为O.lmg/L和0.2吨/L时诱导率分别达到84.18%和85.04%；当蔗糖浓度为20.0g/L诱导率达到最大为82.40%。综合分析不同因素、不同浓度的处理组合，总结出对芽的初代培养的最佳培养组合为:MS+62BA（1.0mg/L）+NAA（0.1~0.2mg/L）+蔗糖（20g/L）o2.2不同因素对继代培养的影响
7、观察试验，发现继代培养过程4V诱导的芽有丛生芽和单生芽2种形式。丛生芽生长缓慢，高度2.0cm左右，茎和叶细弱，容易产生玻璃化现象；单生芽徒长，节间较长，高度3.0〜4.0cm,叶片较大，茎较细弱。诱导率二诱导数/（接种总数・污染数■死亡数）X100%-由表2看出,6・BA对继代培养的影响（极差值为9.87）大于NAA的影响（极差值为7.97）o并且较高浓度的62BA诱导效果优于较低浓度的62BA,以1.5mg/L的效果最好，诱导率达到88.37%；较低浓度的NAA诱导效果优于较高浓度的NAA,0.2mg/L的效果最好，诱导率达
8、到87.37%。另外试验发现,GA3对促进芽的增殖和伸长生长有较明显的作用。当不添GA3时,芽的诱导率明显较低，且芽的诱导缓慢，生长势较弱，丛生芽较少，伸长量少；添加GA3时,芽的诱导率显著提高，芽的诱导较快,明显促进了增殖和伸长生长。当GA3浓度为l.Omg/
