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时间:2020-03-13
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1、色层分析(chromatographyic)的发明对于二十世纪的化学,生物化学与医学上的贡献儿乎超越其他单一的发明,今天,色层分析是使用最普遍的分析或分离方法。层析技术不但精确,可靠,快速而且最大的优点是能分离复杂类似的物质并有极高灵敏度。层析技术特别是吸附性色层分析(吸附色谱技术),于1906年为一苏联植物学家仕伟(M。Tswett)所发明,并利用于叶绿素的分离研究。然而经过二十多年几乎被遗忘,于1931年再由三位德语系的化学家谷恩(R.库恩),文特斯坦(A.Winterstein)与李徳瑞(E.莱徳勒),重新利用于类胡萝卜素(类胡萝卜素)的分离研究。随后不到几年变成普
2、遍应用的实验方法。本文即探讨色层分析技术为何被人遗忘,为何有二十五年的冬眠期。仕伟与吸附色层分析技术的发明任何一木色层分析的参考书均描述各种不同的层析方法,如管柱(列)吸附层析,纸上(纸)层析,气液相(气液)层析与高性能(高性能)液相层析等。而本文只讨论首先开发的管柱吸附色层分析。仕伟于1872年五月十九日生于义大利西北部的阿斯提邙可斯蒂);其父为苏联国民,母亲是义大利人出生不久后全家搬到瑞士,仕伟先后在瑞士洛桑与日内瓦接受教育,1891年进日内瓦大学理学院念植物学,1896年得博士学位。在他的博士论文v细胞生理学研究〉中,提出叶绿素是结合于叶蛋片质中。仕伟于1896年回
3、苏联,1897年于圣彼得堡(现在的列宁格勒市)教授植物解剖学与牛理学,并做一些叶绿体化学上的研究,1901年任职波兰华沙大学兽医学院与华沙工艺学院讲师,1907年升任植物学与微生物学正教授。仕伟一生最重要的研究工作包括叶绿素的色层分析均在华沙完成。第一次世界大战中断了他的研究工作,1915年他随华沙工艺学院迁1917年至苏联内陆年出任爱沙泥亚(今为苏联一联邦)都巴(Dopart)大学植物系主任;1918年徳军再次入侵使他再逃至苏联内陆仕伟于1919年六月二十六日死于肺结核(一说为心脏病),时年47岁。他的坟墓于第二次世界大战遭战火破坏,现已无法寻得。十九世纪末期许多科学家
4、对植物中的叶绿素非常感兴趣,但叶绿素不稳定容易破坏,在当时尚无一可靠的方法用以分离与提纯。身为植物生物学家,仕伟一直不相信化学家以传统化学方法所制备的叶绿素,能真正代表活植物中的叶绿素,他也不相信其他研究员分离的叶绿素是单一纯粹的物质,他又指出,当时的叶绿素化学知识对于植物光合作用的了解一无帮助;很显然仕伟认为要了解光合作用,提纯与制备的叶绿素,必须愈接近植物体内的叶绿素愈好。仕伟的一牛几乎完全投入叶绿素的研究。既然不相信化学家制备的叶绿素,仕伟开始寻找一种可靠H温和的物理方法来将叶绿素分离,他有系统的试验各种不同抽提叶绿素的溶剂与超过100种以上有选择吸附特性的固体。仕
5、伟并演绎出一些吸附性质上的重要法则。仕伟一生发表大约40篇科学文章,并写了一本书,其中尤以1906年发表于徳国植物学杂志的二篇文章最有价值该二文不仅清楚的描述色层分析的技术,并且为色层分析技术命名,其命名已为科学界普遍接受下面摘录其中一段的一些精华部分:“当叶中色素用石油瞇萃取后,倒入一充满碳酸钙的管柱,则不同的色素,依其吸附性的强弱,由上到下分成不同的色层,若在同一管柱上倒入纯石油瞇冲洗,则分离效果更好。各种色素在碳酸钙管柱上分离,就如光谱一样,是遵照物理法则,能被定性与定量,我称此为色层谱,而其方法则是色层分析方法,当然我描述的吸附现彖不只限于叶绿素,所有无色与有色的
6、化合物均遵照同一法则。“色层(色谱法)是希腊语的混合字。色度意为颜色,而graphe则为书写之意。不知是有意,还是巧合,仕伟的名字在俄语中也是“颜色”的意思。使用管柱吸附层析來分离化合物,仕伟并不是第一人。在仕伟之前最活跃者是美国人戴大伟(大卫日),此人任职于美国地质调查局前后共28年(其中21年为矿物组主任)戴氏于1897年将原油加压流入打碎的漂土,原油分成数层;,他并深入研究其原因1900年于巴黎第一届国际石油会议和1903年的第四十三届美国地质学会,戴氏分别发表其石油吸附分离的研究结果。戴氏虽然注意到石油吸附分离法可能的应用价值,然而他和他的研究员解释得并不正确且称
7、此法为“毛细扩散法“仕伟在吸附层析技术的贡献超越戴氏,主要有二点:第一,仕伟注意并正确的解释色层分离过程;第二,仕伟设计用纯溶剂冲洗以提高色层分离效果。这就是今天仕伟被尊称为色层分析技术的开山祖。为何这种非常有效实用的色层分离技术几乎被遗忘呢?我们必须检讨本世纪初期如日中天的德国化学,希望从当时最著名的有机化学家之一的维尔仕塔特(R.Willstatter)来看看化学研究(特别是植物色素)对当时研究天然物化学的影响,找出一些可能的答案。1.2ASHORTHISTORYOFHPLCWehavenotedthedevelopmen
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