植物生理学实验课件7&8培 养 基 配 制.ppt

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1、植物组织培养实验之一：培养基配制一、实验目的掌握培养基的配制方法，为烟草组织培养准备好培养基二、实验内容配制：MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L三、实验步骤（一）母液配制（参照MS培养基配方）大量元素——N、P、K、Ca、Mg、S微量元素——I、B、Mn、Zn、Mo、Cu、Co铁盐——Fe有机化合物——肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸植物生长调节剂——NAA、6-BA（二）每L用量及配制方法1、先在搪瓷量杯中加入约700ml蒸馏水，依次加入下列组份并搅拌溶解：大量元素10X100mlCaCl2100X10ml微量元素100X10ml铁盐100X10ml肌醇1

2、00X10ml烟酸0.5mg/ml1ml盐酸吡哆醇0.5mg/ml1ml盐酸硫胺素0.1mg/ml1ml甘氨酸2.0mg/ml1mlNAA0.1mg/ml1ml6-BA1.0mg/ml1ml蔗糖30.0g琼脂7.0g（要求每个大实验台上的8名同学共配500ml，注意用量减半）2、定容到1000ml。3、测pH并调到5.8（利用酸碱调节，酸碱计）。4、加琼脂7.0g，加热熔化(煮沸2次)，补充蒸馏水至1000ml刻度液面。5、分装到试管。每人共分装2管，每管培养基液面高度2-3cm。拧盖密封。6、高压蒸汽灭菌（保证培养基无菌）。121℃15-20min。本灭菌锅从进到出2hr。7、冷却

3、凝固，4－10℃下贮存，为下次备用。植物组织培养实验之二：烟草组织培养一、实验目的掌握无菌操作方法和烟草组织培养中的快繁技术二、实验内容烟草叶片愈伤组织的转接与培养三、实验原理全能性激素调控四、实验步骤1、本无菌室的设计及仪器使用介绍2、本实验的几种灭菌法介绍3、本实验所用的培养基：MS+NAA0.1mg/L+6-BA1.0mg/L4、外植体：从烟草种子经无菌培养获得的烟草叶片愈伤组织5、进入无菌室和操作前的准备。冼手、鞋套、酒精棉花擦手和桌面。6、取材和接种。在超净台上按无菌操作法从培养皿中钳取1块带叶片的愈伤组织到置于台面上的已预先灭菌的滤纸上，用解剖刀切分成约0.5cm见方的小

4、块，用镊子放入琼脂固体培养基上的中部。每人接种1管。软木塞封口，加盖。7、培养。置培养架上26℃4000lux日光灯下培养。用记号笔在试管玻壁上方写上名字和日期。拍照。培养时间2周。2周后将试管带走。挂或置于有光的寝室窗台上继续培养观察。五、结果和讨论每周观察培养物的生长发育和污染状况，拍照和文字记录。与其他组的结果对比。来培养室的观察时间选在每周二到周四（白天有人）。六、报告提交起始对照