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时间:2020-11-23
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1、植物生理学实验西南科技大学生命科学与工程学院植物生理是实践性很强的学科,学生必需通过实验、实习才能加深对理论课的理解,并为后续专业课的学习打好基础,同时,通过实验、实践可以提高学员观察问题和解决问题的能力,提高学员的动手能力及独立思考、分析问题的能力;在实验课中要通过实例论述论证,让学生认识到实验的重要性,培养学生对实验课的兴趣;系统介绍植物生理的一般研究方法和基本技术;一、植物生理学实验的基本要求重视培养学生的实际操作技能,不片面追求实验数据的准确性,培养学生实事求是的科学态度。对一些不能开设的实验,通过演示实验的方式,拓宽学生视野,完善实验内容。学生
2、都应参加实验实习环节,选作部分实验,了解植物生理的主要测试技术,在教师的指导下,独立或团队操作,完成实验内容并用所学的知识,综合分析,写出实验报告,解释有关现象并讨论实验结果。实验课程单独考核,单独记成绩。一、植物生理学实验的基本要求二、植物生理学实验的目录实验一种子生活力的快速测定--------------------------4学时实验二小蓝子法测定植物的呼吸速率-------------------4学时实验三叶绿素a、b含量的测定---------------------------4学时实验四植物抗逆性的鉴定(电导仪法、丙二醛含量的测定、植
3、物根系POD活性的测定)------------------------------------12学时实验五改良半叶法测定植物光合速率(选做)--------4学时实验六谷类种子萌发时淀粉酶活性的测定(选做)--4学时实验一植物种子生活力的快速测定(TTC法、染料染色法)种子生活力:是指种子能够萌发的潜在能力或种胚具有的生命力。没有生活力的种子是死亡的种子,不能萌发。种子寿命:种子从发育成熟到丧失生活力所经历的时间。种子寿命既与植物种类有关,也与贮藏条件(种子含水量、贮藏温度)有关。正常性种子:水稻、玉米、小麦等种子(1-3年)短寿命:柳树种子(12h
4、)长寿命:莲子(400年)贮存条件:低温、低湿,保存时间长实验一植物种子生活力的快速测定(TTC法、染料染色法)[种子生活力检测评估方法](1)还原力:呼吸→NADH→还原TTC,胚呈红色。(2)原生质着色:活种子不易着色,原生质膜具有选择透性。(3)呼吸释放CO2,pH下降,酸碱指示剂显色。(4)细胞中的荧光物质:紫外照射发蓝、蓝紫色荧光。(5)外观目测法:用肉眼观察玉米种胚形状和色泽。凡种胚凸出或皱缩、显黑暗无光泽的,则种子新鲜,生活力强,可作生产用种。(6)浸种催芽法先将100粒种子用水浸约两小时吸胀,放于湿润草纸上,盖以湿润草纸,置于氧气充足,室
5、温10-20℃环境中,让种子充分发芽;再以发芽的种子粒数除以100,乘以100%,求得发芽率。这种测定方法虽然准确,但需要8天时间。实验一植物种子生活力的快速测定(TTC法、染料染色法)[实验目的]了解种子活力测定生产意义掌握重要种子活力测定方法和评价标准理解TTC/染料法测定种子活力的原理[实验原理]TTC法当TTC溶液渗入种胚的活细胞内,并作为氢受体被脱氢辅酶(NADH或NADPH)还原时,可产生红色的三苯甲腙(TTF),胚染成红色;如果种胚死亡则不能染色,种胚生命力衰退或部分丧失生活力则染色较浅或局部被染色。染料染色法有生命力种子胚细胞的原生质膜具
6、有半透性,有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入细胞内,胚部不染色;而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可以自由进入细胞内,使胚部染色。实验一植物种子生活力的快速测定(TTC法、染料染色法)[实验材料及药品]不同活力的玉米和小麦种子0.5%氯化三苯四氮唑法(TTC法)红墨水(稀释20倍)刀片培养皿实验一植物种子生活力的快速测定(TTC法、染料染色法)[实验步骤]一、氯化三苯四氮唑法(TTC法)1、原理凡是生活细胞,就有新陈代谢。渗入生活细胞的无色的TTC能被脱氢辅酶(NADH2或NADPH2)上的氢还原成红色产物(TTF),
7、肉眼可辨。2、材料:玉米、小麦(吸胀种子)3、方法:100粒种子,沿中心线纵切为二,做如下处理:100半粒+0.5%TTC→30℃,60min→检查100半粒,煮沸5min注意:胚为红色的为具活力种子。4、作业:计数活种子数,计算活种子的百分率。实验一植物种子生活力的快速测定(TTC法、染料染色法)[实验步骤]二、红墨水染色法1、原理生活细胞的原生质膜对物质吸收有选择性,而死细胞的无此功能,红墨水颗粒可以进入。2、材料:玉米、小麦(吸胀种子)3、方法种子100粒,沿中心线纵切为二,做如下处理:100半粒+5%红墨水→室温,60min→检查100半粒煮沸5
8、min注意:胚部着色(红色)很浅或不着色者为生活种子,胚与胚乳着色程度相当者为死
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